Μεταβολές του κυτταρικού πολλαπλασιασμού κυττάρων του πνεύμονα υπό την επίδραση βιολογικών υγρών φυσιολογικών και πασχόντων ατόμων

Abstract

Sarcoidosis is a multisystemic disease of unknown origin. People of all racial , ethnic or age groups may be affected. Relationship between sarcoidosis and cancer has been suspected since 1974, when an increased incidence of malignancy was noted among sarcoidosis patients compared to the general population Several studies have been designed since, to associate sarcoidosis to cancer, with conflicting results though Aim of our study was to investigate whether sarcoidosis patients serum has any impact on cell proliferation rate of a standard carcinoma cell line, a finding that could indirectly suggest a cancerous predisposition of these patients. The study was performed on A549 epithelial lung carcinoma cell line. Twenty two (22) patients with sarcoidosis, and 9 normal subjects (controls) were enrolled in the present study. To investigate the viability and the proliferation rate of A549 cells, serum treatment was performed as follows: 6-well plates were seeded with 10x104 cells/ well for 2 hours in order to allow the cells to adhere. Cell medium was replaced and fresh medium was added, supplemented with 1% (v/v) human serum (either from normal, or sarcoidosis suffering subjects). Cells were incubated either for 24 or 72 hours. After 24 or 72 hours of incubation cells were harvested after being washed twice with Dulbecco’s PBS without calcium and magnesium. Concentration of 1% (v/v) of human serum was applied as it revealed the best performance on cell proliferation rate without any side effects. Data are expressed as mean ± SD. Statistical analysis was performed by means of Student’ s unpaired t-test and p-values less than 0.05 were considered statistically significant. Treatment of A549 cells with normal human serum, for 24 or 72 hours, produced no changes to the proliferation rate compared to the untreated cells. On the contrary, treatment of A549 cells with serum from sarcoidosis patients significantly increased the proliferation rate and accordingly the total cell number, when these cells were treated for either 24 or 72 hours Our findings suggest that some agent(s) in the serum of sarcoidosis patients, increase the ability of these cells to divide. Our findings suggest that a relation between sarcoidosis and cancer could exist. Further studies in that direction could bring more information and help in better understanding of both disorders and in contributing to more effective treatment.

Η σαρκοείδωση είναι μια πολυσυστηματική φλεγμονώδης νόσος αγνώστου αιτιολογίας που προσβάλλει κυρίως το αναπνευστικό σύστημα Η σχέση της σαρκοείδωσης με την ανάπτυξη κακοήθειας είναι μια παράμετρος που μελετήθηκε πολύ από διαφόρους ερευνητές και υπάρχει αρκετή βιβλιογραφία που ασχολείται με το θέμα χωρίς όμως ακόμη να καταφέρει να απαντήσει στο ερώτημα αν πρόκειται για αιτιολογική ή συμπτωματική σχέση. Σκοπός της εργασίας μας ήταν μελετήσουμε την επίδραση βιολογικών υγρών, και πιο συγκεκριμένα ορό από αίμα ασθενών με σαρκοείδωση, πάνω σε καρκινικά κύτταρα του πνεύμονα προκειμένου να προσεγγίσουμε με έναν τελείως διαφορετικό τρόπο την πιθανή συσχέτιση της σαρκοείδωσης με τον καρκίνο. Συλλέξαμε δείγματα αίματος από 22 διαγνωσμένους ασθενείς με σαρκοείδωση και από 9 φυσιολογικά άτομα που χρησιμοποιήθηκαν ως μάρτυρες. Για την διεξαγωγή του πειράματος χρησιμοποιήθηκε η κυτταρική σειρά Α549. Πρόκειται για ανθρώπινα κύτταρα από αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα Η έκθεση των Α549 κυτταρων σε ανθρώπινο φυσιολογικό ορό είτε για 24 είτε για 72 ώρες δεν επέφερε καμία αλλάγη στον ρυθμό πολλαπλασιασμού. Αντίθετα η έκθεση των Α549 κυττάρων σε ορό σαρκοειδικών ασθενών επηρέασε τον ρυθμό πολλαπλασιασμού. Ο σαρκοειδικός ορός προκάλεσε αύξηση του ρυθμού πολλαπλασιασμού των κυτταρων της καλλιέργειας τόσο κατόπιν έκθεσης 24 ωρών σε αυτόν όσο και μετά από έκθεση 72 ωρών . Η μεταβολή αυτή του ρυθμού πολλαπλασιασμού είναι στατιστικώς σημαντική για p<0,05. Από κάποιους ερευνητές που έχουν μελετήσει την σχέση σαρκοείδωσης καρκίνου θεωρείται ότι η φλεγμονώδης αντίδραση που παρατηρείται στην σαρκοείδωση μπορεί να είναι μια γενεσιουργός αιτία για την ανάπτυξη κακοήθειας . Συμπερασματικά ερχόμαστε να συμφωνήσουμε με αυτούς που τάσσονται υπέρ της ύπαρξης ενός <σαρκοειδοκαρκινικού> συνδρόμου γιατί με τα πειράματα μας δείξαμε ότι επώαση καρκινικών πνευμονικών κυττάρων με ορό από ασθενείς με σαρκοείδωση αυξάνει σημαντικά τον ρυθμό πολλαπλασιασμού τους γεγονός που κατά την γνώμη μας σημαίνει ότι έμμεσα επιβεβαιώνεται η ύπαρξη μιας σχέσης μεταξύ της σαρκοείδωσης και της ανάπτυξης καρκίνου. Περαιτέρω έρευνα στην κατεύθυνση που κινηθήκαμε αλλά και σε άλλες κατευθύνσεις ίσως καταφέρουν να προσδιορίσουν τον μηχανισμό με τον οποίον μια νόσος που συνήθως έχει μια αυτοιάσιμη πορεία οδηγεί σε μια άλλη με καταστροφική συνήθως πρόγνωση