Αντιμετώπιση των ισχαιμικών-υποξικών εγκεφαλικών βλαβών σε νεογέννητους επίμυες

Abstract

The purpose of the present study is to investigate the neuroprotective role of NAC, EPO and their combination a) immediately after neonatal hypoxic-ischemic insult by histological and immunohistochemical evaluation, b) assessing long-term functional improvements by sensorimotor tests and structural improvements by neuropathology score. Hypoxic-ischemic brain injury was performed using the experimental model of Levine (1960) as modified by Rice et al, (1981). Seven days old rats were subjected to permanent unilateral ligation of the left common carotid artery. Hypoxia was induced by exposing the animals to a mixture of 8% oxygen- 92% nitrogen for 1 hour. The experimental animals were divided into 5 groups The first group A consisted of 27 age-matched rats which were subjected to identical surgical procedure without ligation and served as control (without HI) Group Β (n= 30) was subjected to Η I and received a similar volume by body weight of 0,9% saline (H I) Groups C, D, E (n=37, n=27, n=27) underwent Η I and were treated immediately after hypoxia with NAC, EPO, NAC+EPO, respectively. In conclusion, the results of the present study suggest that a) Both EPO and NAC as well as their combination administered immediately after neonatal hypoxic-ischemic insult exert long term neuroprotective effect by reducing the progression of neuronal injury and sensorimotor deficits b) The neuroprotective role of EPO or its combination with NAC seems more prominent, although not significant statistically. This suggestion is based on histopathological evaluation and immunohistochemical study c) The therapeutic potential of EPO or its combination with NAC administered after Η I insult might provide a useful tool to prevent neuronal loss paralleled with long-term Η I - induced functional abnormalities. Moreover, the safe and well-tolerated profile of EPO or NAC as therapeutic agants strongly supports their evaluation for neuroprotective treatment in the clinical trials.

Ο σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η διερεύνηση του νευροπροστατευτικού ρόλου της NAC, της ΕΡΟ και του συνδυασμού τους: (και η διερεύνηση του δοσολογικού σχήματος της NAC που θα προσφέρει τη μεγαλύτερη προστασία): α) αμέσως μετά την Υ.Ι. βλάβη με ιστολογική και ανοσοϊστοχημική μελέτη, β) 42 ημέρες μετά προκειμένου να εκτιμηθεί: 1) η μακροχρόνια λειτουργική βελτίωση (αισθητικοκινητικές δοκιμασίες), 2) οι ιστολογικές βελτιώσεις (νευροπαθολογική κλίμακα). Η Υ.Ι. εγκεφαλική βλάβη προκλήθηκε με το πειραματικό πρότυπο του Levine (I960), όπως αυτό τροποποιήθηκε από τον Rice και συν. (1981), σε επίμυες ηλικίας 7 ημερών. Το σύνολο των πειραματόζωων περιλαμβάνει τις παρακάτω ομάδες: Ομάδα Α: 27 επίμυες, γενικοί μάρτυρες (χωρίς ισχαιμία-υποξία). Ομάδα Β: 30 επίμυες, ειδικοί μάρτυρες (εφαρμογή ισχαιμίας-υποξίας). Ομάδα Γ: 37 επίμυες στους οποίους χορηγήθηκε ενδοπεριτοναϊκά NAC πριν και μετά την υποξία σε διαφορετικές δόσεις (NAC50mg/Kg, NAC150mg/Kg, NAC500mg/Kg). Ομάδα Δ: 27 επίμυες στους οποίους χορηγήθηκε ερυθροποιητίνη μετά την υποξία (EPO2000IU/Kg). Ομάδα Ε: 27 επίμυες, στους οποίους έγινε συγχορήγηση NAC100mg/Kg πριν την υποξία και ερυθροποιητίνης (EPO2000IU/Kg) μετά την υποξία. Συμπερασματικά: 1) Από την ιστολογική εκτίμηση προκύπτει σημαντική βελτίωση της Υ.Ι. εγκεφαλικής βλάβης τόσο μετά τη χορήγηση της NAC όσο και της ΕΡΟ ή του συνδυασμού των δύο ουσιών. Εντούτοις, καλύτερη ιστολογική εικόνα εμφανίζεται στα πειραματόζωα που έλαβαν ΕΡΟ ή συνδυασμό. 2) Η ευνοϊκότερη νευροπροστατευτική δράση της ΕΡΟ ή του συνδυασμού EPO+NAC υποδηλώνεται έμμεσα και από την ανοσοϊστοχημική μελέτη 48 ώρες μετά την Υ.Ι. βλάβη όπου διαπιστώνεται μεγαλύτερη μείωση της έκφρασης της iNOS. 3) Οι αισθητικοκινητικές δοκιμασίες βελτιώθηκαν σημαντικά με τη χορήγηση όλων των ουσιών (NAC, ΕΡΟ, ΕΡΟ+ NAC), εύρημα που υποδηλώνει τη μακροπρόθεσμη νευροπροστατευτική τους δράση. Συνεπώς η ΕΡΟ εμφανίζει εξίσου σημαντική νευροπροστατευτική δράση με τη NAC. Επιπλέον ενώ ο συνδυασμός ΕΡΟ+ NAC δεν υπερέχει στατιστικά σημαντικά, εντούτοις φαίνεται ότι υπάρχει τάση για αποτελεσματικότερη νευροπροστασία με βάση τα ιστολογικά αποτελέσματα και τις μικρές διαφορές σε μεμονωμένες αισθητικοκινητικές δοκιμασίες. Με βάση τα ευρήματα μας είναι δυνατό να υποστηριχθεί ότι η ΕΡΟ ή ο συνδυασμός ΕΡΟ+ NAC αποτελούν χρήσιμο εργαλείο όσον αφορά την πρόληψη της νευρωνικής βλάβης και την εξέλιξη των νευρολογικών ελλειμμάτων.