Ανοσοϊστοχημική μελέτη του οφθαλμού κατά τη διάρκεια του δεύτερου τριμήνου της εμβρυϊκής ανάπτυξης

Abstract

The present work is based on an immunohistochemical study of the human eye during the second trimester of pregnancy. In particular, the impact of chorioamnionitis on embryonic ocular cytoskeleton and the extracellular matrix were studied, both in otherwise normal foetuses and in the setting of several clinical syndromes. The general part of the study contains a review of the clinical syndromes in question and the elements of the cytoskeleton and the extracellular matrix that were studied. We also provide bibliographic evidence and comment on recently acquired knowledge on the issue. Furthermore, a concise review of embryonic eye development is included to help familiarise the reader with the tissues studied and their origins. The special part is dedicated to the presentation of the actual immunohistochemical study. Employing special antibodies, we studied the expression of six proteins and glycoproteins in foetal Eyes. 15 out of the 87 foetuses that were included, were of normal phenotypical appearance without any inflammation in the chorioamnionic villi. The remaining ones had chorioamnionitis of various degree. Some of the subjects had a background of Down syndrome, toxoplasma or cytomegalovirus infection, or a hydatidiform mole. Using immunohistochemistry, the expression of vimentin, myosin, desmin, fibronectin, tenascin-C and tenascin-R was detected and quantified. The findings were submitted to statistical analysis, employing the Mann-Whitney U-test. The results demonstrated that all six proteins and glycoproteins had completely normal expression in the foetuses of normal appearance with mild or no chorioamnionitis, while in all other cases their expression was impaired to a statistically important degree. This was particularly evident in the subjects with toxoplasma or CMV infection, or trisomy 21.Our findings suggest that there could exist more direct mechanisms by which chorioamnionitis may condition the foetal Eye to structural changes, apart from the obvious and well-documented indirect way by provoking preterm birth.

Η παρούσα μελέτη πραγματεύεται μια ανοσοϊστοχημική μελέτη της ανάπτυξης του ανθρώπινου οφθαλμού κατά το δεύτερο τρίμηνο της κύησης και ειδικότερα των επιπτώσεων στον κυτταρικό σκελετό και στην εξωκυττάρια θεμέλια ουσία της χοριοαμνιονίτιδας, είτε μεμονωμένης, είτε στο πλαίσιο κλινικών συνδρόμων. Στο γενικό μέρος της μελέτης, γίνεται αναφορά στα συγκεκριμένα αυτά κλινικά σύνδρομα, καθώς και στα στοιχεία του κυτταρικού σκελετού και της εξωκυττάριας θεμέλιας ουσίας που μελετήθηκαν. Γίνεται βιβλιογραφική αναφορά σε πρόσφατα αποκτηθείσες γνώσεις σε σχέση με τα ανωτέρω. Επίσης γίνεται μια συνοπτική επισκόπηση της ανάπτυξης του εμβρυικού οφθαλμού, ώστε ο αναγνώστης να εξοικειωθεί με τους ιστούς που μελετήθηκαν και την προέλευσή τους. Στο ειδικό μέρος, παρουσιάζεται η εργαστηριακή μελέτη που διεξήχθηκε. Με τη χρήση ειδικών αντισωμάτων, μελετήθηκε η έκφραση έξι διαφορετικών πρωτεϊνών και γλυκοπρωτεϊνών σε ανθρώπινους εμβρυικούς οφθαλμούς. 15 από τα 87 έμβρυα που μελετήθηκαν είχαν φυσιολογική εμφάνιση και δεν διαπιστώθηκε φλεγμονή στους υμένες χορίου-αμνίου. Τα υπόλοιπα είχαν χοριοαμνιονίτιδα ποικίλης βαρύτητας. Ορισμένα από τα έμβρυα είχαν ιστορικό συνδρόμου Down, προσβολής από τοξόπλασμα ή από κυτταρομεγαλοϊό ή μύλης κύησης. Με τη μέθοδο της ανοσοϊστοχημείας ανιχνεύθηκε και προσδιορίστηκε ποσοτικά, η έκφραση των βιμεντίνης, μυοσίνης, δεσμίνης, ινονεκτίνης, τενασκίνης-C και τενασκίνης-R. Τα ευρήματα υποβλήθηκαν σε στατιστική επεξεργασία με τη μέθοδο της δοκιμασίας του Mann-Whitney U-test.Τα αποτελέσματα δείχνουν ότι οι χρώσεις και των έξι πρωτεϊνών και γλυκοπρωτεϊνών ήταν απολύτως φυσιολογική για τις ομάδες των εμβρύων με ήπιου βαθμού ή καθόλου χοριοαμνιονίτιδα, ενώ σε όλες τις άλλες περιπτώσεις η έκφραση τους ήταν σημαντικά επηρεασμένη. Αυτό ήταν ιδιαίτερα εκσεσημασμένο στις περιπτώσεις με ιστορικό προσβολής από τοξόπλασμα ή κυτταρομεγαλοϊό ή με τρισωμία 21. Η ερμηνεία των ευρημάτων δείχνει την πιθανή ύπαρξη και άμεσων μηχανισμών, με τους οποίους η χοριοαμνιονίτιδα να προκαλεί δομικές ανωμαλίες στον εμβρυικό οφθαλμό, πέρα από τον έμμεσο μηχανισμό δια της πρόκλησης πρόωρου τοκετού.