Μεσολαβητές φλεγμονώδους αντίδρασης κατά την περιγεννητική ασφυξία και περιγεννητική και ενδονοσοκομειακή λοίμωξη

Abstract

The inflammatory response induced by perinatal and nosocomial infections (PI, NI) and perinatal asphyxia (PA) is considered to participate in neonatal brain damage. Inflammatory responses are characterized by the expression of chemokines. Although chemokine levels have been investigated in healthy newborns, their role during neonatal pathological conditions has not been studied. The aim of our study was to examine chemokine serum and mRNA levels in asphyxiated and infected neonates.Peripheral blood samples were obtained from perinatally asphyxiated and infected neonates during the first days of life and from neonates who developed nosocomial infections. Serum levels of interleukin-8 (IL-8), infection-γ-inducible protein-10 (IP-10), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), macrophage inflammatory protein-1α (MIP-1α), and regulated upon activation, normal T cells expressed and secreted (RANTES) were determined. IL-8 and MCP-1 mRNA levels were investigated from infected and asphyxiated neonates in whole blood and in phytohemagglutinin–activated lymphocytes using semi-quantitative polymerase chain reaction and real-time polymerase chain reaction, respectively.In perinatally asphyxiated neonates, IL-8 levels were significantly elevated on the 1st day of life. In perinatally infected neonates, IL-8 and IP-10 levels were significantly increased on the 1st day of life, while RANTES levels were significantly lower and remained so until the 4th day. In nosocomially infected neonates, IL-8, IP-10 and MIP-1α levels were significantly increased on diagnosis of infection. IL-8 mRNA levels were significantly increased in whole blood both during PA and PI, while MCP-1 mRNA levels were not. In vitro activated lymphocytes expressed significantly increased IL-8 mRNA levels during PI, whereas no increase was observed during PA. MCP-1 mRNA levels were significantly increased in activated lymphocytes during PI.In conclusion the neonatal immune system is able to produce chemokines for the induction of an inflammatory response during perinatal asphyxia and perinatal infection. Our data show that chemokine mRNA levels expressed by activated lymphocytes during inflammation caused by Pls are different to those expressed during PAs. These findings might have important implications during the administration of specific chemokine antagonists in order to prevent or reduce tissue damage caused by inflammation.

Η φλεγμονώδης αντίδραση που προκαλείται από τις περιγεννητικές και νοσοκομειακές λοιμώξεις (ΠΛ, ΝΛ) και την περιγεννητική ασφυξία (ΠΑ) μπορεί να προκαλέσει βλάβη στον ανώριμο εγκέφαλο του εμβρύου και του νεογέννητου. Οι χημοκίνες έχει βρεθεί ότι παίζουν σημαντικό ρόλο στην φλεγμονώδη αντίδραση. Έχουν ερευνηθεί τα επίπεδα των χημοκινών σε υγιή νεογνά, ωστόσο δεν έχει μελετηθεί ο ρόλος τους κατά τη διάρκεια αυτών των παθολογικών καταστάσεων των νεογνών. Ο σκοπός της μελέτης μας ήταν να εξεταστούν τα πρωτεϊνικά και τα μεταγραφικά (mRNA) επίπεδα των χημοκινών σε νεογνά με περιγεννητική λοίμωξη και ασφυξία.Δείγματα περιφερικού αίματος ελήφθησαν από νεογνά με περιγεννητική ασφυξία και λοίμωξεις τις πρώτες ημέρες ζωής. Τα επίπεδα της IL-8, της IP-10, της MCP-1, της MIP-1α και της RANTES μετρήθηκαν στον ορό των νεογνών αυτών. Τα επίπεδα του mRNA της IL-8 και της MCP-1 μετρήθηκαν σε ολικό αίμα και σε λεμφοκύτταρα ενεργοποιημένα με PHA χρησιμοποιώντας semi quantitative PCR και real-time PCR αντίστοιχα.Τα επίπεδα IL-8 στον ορό νεογνών με περιγεννητική ασφυξία βρέθηκαν σημαντικά αυξημένα την 1η ημέρα ζωής τους. Τα επίπεδα IL-8 και IP-10 στον ορό νεογνών με περιγεννητική λοίμωξη βρέθηκαν στατιστικά αυξημένα την 1η ημέρα ζωής τους, ενώ τα επίπεδα της RANTES ήταν χαμηλά και παρέμειναν χαμηλά έως την 4η ημέρα. Τα επίπεδα των χημοκινών IL-8, IP-10 και MIP-1α ήταν στατιστικά αυξημένα σε νεογνά με ενδοσοκομειακές λοιμώξεις τη στιγμή της διάγνωσης της λοίμωξης. Τα μεταγραφικά επίπεδα της IL-8 ήταν στατιστικά αυξημένα στο ολικό αίμα και στις δύο παθολογικές καταστάσεις (ΠΑ και ΠΛ) ενώ αντίστοιχη αύξηση του mRNA της MCP-1 δεν διαπιστώθηκε. Τα in vitro ενεργοποιημένα λεμφοκύτταρα παρουσίασαν σημαντική αύξηση των επιπέδων του mRNA της IL-8 στις περιγεννητικές λοιμώξεις ενώ δεν παρατηρήθηκε αύξηση στην περιγεννητική ασφυξία. Τα επίπεδα του mRNA της MCP-1 αυξήθηκαν σημαντικά στα ενεργοποιημένα λεμφοκύτταρα των νεογνών με ΠΑ, ενώ δεν παρατηρήθηκε αντίστοιχη αύξηση στα νεογνά με περιγεννητική λοίμωξη. Συμπερασματικά το ανοσοβιολογικό σύστημα των νεογνών μπορεί να παράξει χημοκίνες, κατά την ανοσολογική απάντηση στην περιγεννητική ασφυξία και στις περιγεννητικές και ενδοσοκομειακές λοιμώξεις. Τα αποτελέσματα της μελέτης δείχνουν ότι τα επίπεδα του mRNA των χημοκινών που εκφράζονται από τα ενεργοποιημένα λεμφοκύτταρα κατά τη διάρκεια της φλεγμονώδους αντίδρασης που προκαλείται από τις περιγεννητικές λοιμώξεις είναι διαφορετικά από εκείνα που εκφράζονται κατά την περιγεννητική ασφυξία. Τα ευρήματα αυτά ενδέχεται να παίζουν ρόλο κατά τη διάρκεια της χορήγησης ειδικών ανταγωνιστικών των χημοκινών με σκοπό την πρόληψη ή την μείωση της ιστικής βλάβης που προκαλείται από τη φλεγμονώδη αντίδραση.