Βιολογικές δράσεις ουσιών φυτικής προέλευσης σε πυρηνικούς υποδοχείς

Abstract

At the present thesis phytochemical analysis of endemic plants Ebenus cretica, Ebenus sibthorpi, Medicago marina and Medicago falcata using cutting-edge technologies (ASE, FCPC, NMR) was conducted. Isolated substances were tested in cell lines for estrogenic /anti-estrogenic and anti-inflammatory activity. From E.cretica eleven substances were isolated belonging to the class of flavonoids whereas from M.marina four saponins. Ombuoside, maesopsin and two bayogenin glycosides (MMRTK23 & 25) were selected for further control. In order to investigate the mechanism of ombuoside, maesopsin and MMRTK23 in vitro assays generally accepted for their ability to reflect the estrogenicity of a substance were used. The effect of the compounds on the IGFBP-3 protein and the PS2 gene was tested in breast cancer cells (MCF-7). Osteoblasts KS483 were tested for the increased creation of mineralized nodules. Furthermore in vivo study of the total methanolic extract of E.cretica in ovariectomized Wistar female rats was performed. According to the results the ombuoside and maesopsin exhibit mild estrogenic activity which is engaged through the estrogen receptors.In order to gain further insight of the activity of the saponins in the inflammation process PC-3 prostate cancer cells were used. The possible effect of saponins on the cell viability of PC-3 and on the translation of the interleukin IL-6 was investigated. The results showed that at all concentrations and dose-dependently the MMRTK23 and 25 reduce the expression of interleukin, however, their action is not performed through the transcription factor NFkB.

Στην παρούσα διδακτορική διατριβή πραγματοποιήθηκε φυτοχημική ανάλυση με χρήση τεχνολογιών αιχμής (ASE, FCPC, NMR) των ενδημικών φυτών Ebenus cretica, Ebenus sibthorpi, Medicago marina και Medicago falcata από τα οποία απομονώθηκαν ουσίες οι οποίες εξετάστηκαν σε κυτταρικές σειρές για την οιστρογονική/αντιοιστρογονική ή/και αντιφλεγμονώδη δράση τους. Από το E.cretica απομονώθηκαν ένδεκα ουσίες που ανήκουν στην ευρύτερη κατηγορία των φλαβονοειδών. Από το M.marina απομονώθηκαν 4 σαπωνίνες. Εξ αυτών ο ομβουοσίδης η μαεσοψίνη και δύο γλυκοσίδες της μπαγιογενίνης (MMRTK23 & 25) επιλέχθηκαν για περαιτέρω έλεγχο.Για τη διερεύνηση του μηχανισμού δράσης των ενώσεων ομβουοσίδης, μαεσοψίνη και MMRTK23 χρησιμοποιήθηκαν in vitro δοκιμασίες, ευρέως αποδεκτές για την ικανότητά τους να αντανακλούν την οιστρογονικότητα μιας ουσίας. Χρησιμοποιήθηκαν δύο είδη κυττάρων, τα καρκινικά κύτταρα μαστού (MCF-7), όπου οι δοκιμασίες αφορούσαν την επίδραση των ενώσεων στην πρωτεΐνη IGFBP-3 και στο γονίδιο PS2 και οι οστεοβλάστες μυός KS483 όπου ελέχθηκε η δημιουργία επιμεταλωμένων οζιδίων. Επιπλέον πραγματοποιήθηκε in vivo μελέτη του ολικού μεθανολικού εκχυλίσματος του E.cretica σε Wistar ωοθηκεκτομημένους θηλυκούς επίμυες. Σύμφωνα με τα αποτελέσματα ο ομβουσίδης και η μαεσοψίνη επιδεικνύουν ήπια οιστρογονική δράση την οποία ασκούν μέσω των οιστρογονικών υποδοχέων. Για τη διερεύνηση της δράσης των σαπωνινών στη διαδικασία της φλεγμονής χρησιμοποιήθηκαν PC-3 καρκινικά κύτταρα προστάτη. Πραγματοποιήθηκε έλεγχος για πιθανή επίδραση των σαπωνινών επί της κυτταρικής βιωσιμότητας των PC-3 και επί της μετάφρασης της ιντερλευκίνης IL-6. Τα αποτελέσματα έδειξαν ότι σε όλες τις συγκεντρώσεις και με τρόπο δοσοεξαρτώμενο οι MMRTK23 και 25 μειώνουν την έκφραση της ιντερλευκίνης ωστόσο στη δράση τους αυτή δεν εμπλέκεται ο μεταγραφικός παράγοντας NFkB.