Μελέτη του είδους και της συχνότητας εμφάνισης της πολυμορφικής θέσης δράσης απαγορευτικών ενδονουκλεασών του γονιδίου της απολιποπρωτεΐνης B-100 στον ελληνικό πληθυσμό και αξιολόγησή της στην ιατροδικαστική

Abstract

Coronary artery disease has been related to a large number of atherosclerosis causing factors such as apolipoprotein B-100. The aim of this study was to investigate some of the characteristics of the ApoB-100 molecule that results from the substitution of the base guanine by an adenine at the position 4154 of the exon 29 of the ApoB gene. This mutation finally result to the substitution of a gloutaminic acid by the aminoacid lysine in the protein chain. – Nuclear DNA was isolated from whole blood. Proper nucleotide markers were used to intensify the exon 29 of the ApoB gene. The recognition of the mutation under investigation was accomplished by using restrictive endonuclease EcoR1. – We studied the following groups: 1. A group of randomly chosen apparently healthy people of Greek origin. 2. The control group (with normal plasma lipid levels). 3. The group of patients with coronary artery disease manifested by coronary arteriography. 4. The hyperlipidemia group (with hyperlipidemic plasma lipid levels). Three genotypes were present: R2R2 for people homozygous for the mutant type of the apoB-100 protein at the EcoRI position, R1R1 coded for people homozygous for the natural ApoB protein and R1R2 for the people bearing both the mutant at the EcoRI position and the nonmutant type of ApoB protein. Our results yielded that: 1) The frequency of the genotype R1R1 in Greek population is 67,8%, the R1R2 28,1% and R2R2 3,9%. 2) The frequency of the R1allele in the same group is 81% and R2 19%. 3) There was found no relation between the type of genotype and the occurrence of myocardial infarction or coronary artery disease. 4) There was found no relation between the type of genotype and increased levels of arterial blood pressure. 5) Genotype R1R2 is related to a hyperlipidemic phenotype characterized by highly increased total cholesterol, triglyceride, LDL and surprisingly of HDL cholesterol. 6. Genotype R2R2, being quite rare, might be used in forensic medicine as part of a genetic code for the identification of unknown biological material.

Η πολυπαραγοντικής παθογένειας, στεφανιαία νόσος έχει, μεταξύ των άλλων, συσχετιστεί και με τα επίπεδα της apoB-100. Σε μοριακό επίπεδο, η μετάλλαξη που μελετήθηκε αφορά στην αντικατάσταση της βάσης γουανίνης από αδενίνη στην πολυμορφική θέση 4154 του εξονίου 29 της apoB-100. Ακολούθησε έλεγχος της μετάλλαξης με τη βοήθεια της απαγορευτικής ενδονουκλεάσης EcoRI. Μελετήθηκαν: 1. Ομάδα βάσης δεδομένων (ελληνική καταγωγή, τυχαία επιλογή δειγμάτων, 2. Ομάδα μαρτύρων (άτομα με φυσιολογικό βιοχημικό έλεγχο), 3. Ομάδα στεφανιαίας νόσου (άτομα με διαγνωσμένη στεφανιαία νόσο), 4. Ομάδα υπερλιπιδαιμικών (άτομα με δυσλιπιδαιμία κατά τον βιοχημικό έλεγχο). Από την μελέτη προέκυψαν τρεις γονότυποι: R1R1 (απουσία μετάλλαξης), R1R2 (ετεροζυγώτες), R2R2 (ομοζυγώτες ως προς την μετάλλαξη). Συμπεράσματα: 1) Η συχνότητα του γονότυπου RIR1 στον Ελληνικό πληθυσμό είναι 67,8%, του R1R2 28,1% και του R2R2 3,9%. 2) Η συχνότητα του αλληλομόρφου R1 είναι 81% και του R2 19%. 3) Δεν υπάρχει καμία σχέση μεταξύ του γονότυπου R1R2 ή R2R2 και της επίπτωσης του εμφράγματος του μυοκαρδίου. 4) Δεν υπάρχει συσχέτιση μεταξύ των γονοτύπων και της αυξημένης αρτηριακής πίεσης. 5) Ο γονότυπος R1R2 πιθανότατα προκαλεί μεταβολική διαταραχή που εκδηλώνεται με δυσλιπιδαιμικά χαρακτηριστικά. 6) Δεδομένης της σπανιότητάς του, ο γονότυπος R2R2 θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί στην Ιατροδικαστική σαν τμήμα γενετικού αναγνωριστικού κώδικα, προς αναγνώριση άγνωστου βιολογικού υλικού, όχι όμως για διερεύνηση πατρότητας, αφού δεν αποτελεί μοναδικό χαρακτηριστικό κάθε ανθρώπου.