Διέγερση Τ λεμφοκυττάρων με CD3+CD28 μονοκλωνικά αντισώματα σε συσχέτιση με το CD28 αντιγόνο επιφάνειας και άλλες παραμέτρους για την παρακολούθηση της HIV-1 λοίμωξης

Abstract

In this study, 152 HIV-1 (+) patients without progression to AIDS were examined for CD28 costimulation and other functional assays as the lymphocyte proliferation responses after stimulation with CD3 MoAb and mitogens like PWM and PHA. The method used was the whole blood culture technique and the patients were examined at baseline and up to either the time to AIDS diagnosis or at the end of the observation period. CD28 surface antigen expression on both CD4+ and CD8+ T lymphocytes was also studied in both groups of patients. It was found that in HIV-1 infection: 1) There is significant reduction of T lymphocyte proliferation responses after CD28 costimulation and other activators. This reduction is obvious early in the course of infection even from the asymptomatic stage. 2) The HIV-1 (+) patients with progression to AIDS showed a significant reduction of proliferation responses after CD28 costimulation at the time of AIDS diagnosis compared with baseline, while the patients without progression to AIDS did not show any significant reduction at the end of the observation period. 3) Univariate time-dependent analysis showed that decreases in (i) absolute numbers of either CD4⁺, D4⁺CD28⁺, CD8⁺CD28⁺ T cells, (ii) CD28 MoAb costimulation, (iii) all the other functional assays and an increase in CD8⁺CD28⁻% are significant predictors for progression to AIDS. 4) Multivariate time-dependent analysis demonstrated that only the decrease of CD28 costimulation from all the functional assays was predictive for progression to AIDS, as were decreases in the percentage of CD4+ T cells and the absolute number of CD4⁺CD28⁺ T cells. Thus, CD28 MoAb costimulation can be considered a useful assay for monitoring HIV-1 infection. 5) A reduction of absolute numbers of CD4⁺CD28⁺ T cells is a better predictor for AIDS, than a decrease in CD4⁺ absolute numbers. 6) Furthermore, apart from the early increase in the percentage of CD8⁺CD28⁻ T cells and an increase in the percentage of CD28⁻ on CD8+ T cells in both groups of patients at baseline compared with normal controls, a negative correlation was found to exist between the percentages of CD4⁺ or CD4⁺CD28⁺ T cells and the percentage of CD28⁺CD28⁻ T cells; this suggests that these cells are probably mutually regulated.

Στην παρούσα διατριβή μελετήθηκαν 152 HIV-1(+) ασθενείς με και χωρίς εξέλιξη σε AIDS για τη CD28 συνδιέγερση και άλλες λειτουργικές δοκιμασίες όπως οι απαντήσεις πολλαπλασιασμού των Τ λεμφοκυττάρων στη διέγερση με CD3 MoAb και μιτογόνα όπως το PWM και το ΡΗΑ. Η μέθοδος που χρησιμοποιήθηκε ήταν η καλλιέργεια ολικού αίματος και οι ασθενείς μελετήθηκαν από την πρώτη επίσκεψη μέχρι και τη διάγνωση του AIDS ή τη λήξη της περιόδου παρακολούθησης. Επίσης μελετήθηκε η έκφραση του CD28 αντιγόνου επιφάνειας στα CD4+ και CD8+ Τ λεμφοκύτταρα και στις δύο ομάδες των ασθενών. Βρέθηκε ότι στην HIV-1 λοίμωξη: 1) Υπάρχει σημαντική ελάττωση των απαντήσεων πολλαπλασιασμού των Τ λεμφοκυττάρων στη CD28 συνδιέγερση και σε άλλους διεγέρτες. Η ελάττωση αυτή γίνεται εμφανής νωρίς στην πορεία της λοίμωξης από το ασυμπτωματικό ακόμη στάδιο. 2) Οι HIV-1(+) ασθενείς που παρουσίασαν εξέλιξη σε AIDS είχαν σημαντική ελάττωση των απαντήσεων πολλαπλασιασμού στη CD28 συνδιέγερση κατά τη διάγνωση του AIDS σε σχέση με τα αρχικά επίπεδα, ενώ οι απαντήσεις των ασθενών χωρίς εξέλιξη σε AIDS παρέμεναν σταθερές κατά τη λήξη της περιόδου παρακολούθησης. 3) Το μονομεταβλητό μοντέλο της Cox regression ανάλυσης για μεταβλητές σε σχέση με το χρόνο έδειξε ότι η ελάττωση (i) του απόλυτου αριθμού (αα) των CD4⁺, CD4⁺CD28⁺ και CD8⁺CD28⁺ Τ κυττάρων, (ii) της CD28 συνδιέγερσης με CD28 MoAb και (iii) των απαντήσεων πολλαπλασιασμού των Τ λεμφοκυττάρων στο CD3 MoAb και τους άλλους διεγέρτες και η αύξηση του CD8⁺CD28⁻% έχουν σημαντική προγνωστική αξία για την εξέλιξη σε AIDS. 4) Στο πολύ μεταβλητό μοντέλο της Cox regression ανάλυσης για μεταβλητές σε σχέση με το χρόνο, μόνο η ελάττωση των απαντήσεων στη CD28 συνδιέγερση από τις λειτουργικές δοκιμασίες είχε σημαντική προγνωστική αξία για εξέλιξη σε AIDS, ενώ προγνωστική αξία είχε και η ελάττωση του ποσοστού των CD4⁺ Τ λεμφοκυττάρων και του απόλυτου αριθμού των CD4⁺CD28⁺ Τ λεμφοκυττάρων. Γι' αυτό το λόγο η συνδιέγερση Τ λεμφοκυττάρων με CD28 MoAb μπορεί να θεωρηθεί ως μια χρήσιμη δοκιμασία για την παρακολούθηση της HIV-1 λοίμωξης. 5) Η ελάττωση του αα των CD4⁺CD28⁺ Τ λεμφοκυττάρων αποτελεί καλύτερο προγνωστικό δείκτη για την εξέλιξη σε AIDS από τον αα των CD4+ Τ λεμφοκυττάρων. 6) Εκτός από την αρχική αύξηση του ποσοστού των CD8⁺CD28⁻ Τ λεμφοκυττάρων και την αύξηση του ποσοστού των CD28⁻ στα CD8⁺ Τ λεμφοκύτταρα που παρατηρήθηκε και στις δύο ομάδες των ασθενών κατά την έναρξη της παρακολούθησης σε σύγκριση με τα φυσιολογικά άτομα, βρέθηκε μια αρνητική συσχέτιση μεταξύ του ποσοστού των CD4⁺ ή CD4⁺CD28⁺ και του ποσοστού των CD8⁺CD28⁻ Τ λεμφοκυττάρων. Είναι πιθανόν οι κυτταρικοί αυτοί υποπληθυσμοί να ρυθμίζονται κατά τρόπο αμοιβαίο.