Αξιοποίηση της γονιδιακής μεταγραφής και μετάφρασης σε προσδιορισμούς νουκλεϊκών οξέων και πρωτεϊνών

Περίληψη

Στους στόχους της διδακτορικής διατριβής συγκαταλέγονται: α) η αξιοποίηση της γονιδιακής μεταγραφής και μετάφρασης για τη μοριακή ενίσχυση του σήματος σε ετερογενείς μεθόδους προσδιορισμού βιομορίων, β) η ανάπτυξη γενικής μεθόδου ταχείας παραγωγής ανασυνδυασμένων φωτοπρωτεϊνών και η εφαρμογή τους ως ιχνηθετών σε αναλύσεις υβριδοποίησης DNA και γ) η μελέτη της βιοφωταυγάζουσας αντίδρασης της ακουορίνης και της οβελίνης παρουσία ιόντων Ca2+ και Tb3+. Ως βασικά εργαλεία έχουν χρησιμοποιηθεί i) τεχνικές ανασυνδυασμού του DNA και ii) έκφραση του DNA σε πρωτεΐνη μέσω συζευγμένης μεταγραφής και μετάφρασης in vitro. Στη διατριβή αυτή επετεύχθη η μοριακή ενίσχυση του σήματος καθώς το ληφθέν σήμα αντιστοιχεί σε περισσότερα του ενός μόρια ιχνηθέτη ανά υβρίδιο προσδιοριζόμενου DNA-στόχου. Παρασκευάσθηκαν βιοφωταυγάζοντες ιχνηθέτες σε λιγότερο από 3 ώρες ενώ η κλασική μέθοδος απαιτεί πολλές ημέρες. Τα ιόντα Tb3+ πυροδοτούν την αντίδραση της ακουορίνης αλλά όχι της οβελίνης, οπότε μπορεί να γίνει δι ...
περισσότερα

Περίληψη σε άλλη γλώσσα

The goals of this doctoral dissertation are: a) the exploitation of gene transcription and translation for molecular signal amplification in heterogeneous identification methods of biomolecules, b) the development of a rapid method for the preparation of recombinant photoproteins and their application as reporters in DNA hybridization assays and c) the comparative study of the bioluminescent reaction of aequorin and obelin triggered by Ca2+ and Tb3+ ions. The basic tools that were used are i) recombination DNA techniques and ii) DNA expression into protein through in vitro transcription and translation. In this dissertation was achieved molecular signal amplification because the signal received corresponds in more than one reporter molecules per target DNA hybrid. Bioluminescent reporters were produced in less than 3 hours compared to several days needed in the classical approach. Tb3+ ions are able to trigger the bioluminescent reaction of aequorin but not that of obelin, thus a dual- ...
περισσότερα

Όλα τα τεκμήρια στο ΕΑΔΔ προστατεύονται από πνευματικά δικαιώματα.

DOI
10.12681/eadd/17747
Διεύθυνση Handle
http://hdl.handle.net/10442/hedi/17747
ND
17747
Εναλλακτικός τίτλος
Exploitation of gene transcription and translation for the development of nucleic acid and protein assays
Συγγραφέας
Δημοπούλου, Χαραλαμπία (Πατρώνυμο: Νικόλαος)
Ημερομηνία
2007
Ίδρυμα
Πανεπιστήμιο Πατρών. Σχολή Θετικών Επιστημών. Τμήμα Χημείας
Εξεταστική επιτροπή
Χριστόπουλος Θεόδωρος
Μοσχονάς Νικόλαος
Ιωάννου Πηνελόπη
Βύνιος Δημήτριος
Καλπαξής Δημήτριος
Συνετός Διονύσιος
Ζαρκάδης Ιωάννης
Επιστημονικό πεδίο
Φυσικές ΕπιστήμεςΧημεία
Λέξεις-κλειδιά
Δοκιμασίες υβριδοποίησης νουκλεϊκών οξέων; Μοριακή ενίσχυση σήματος; Ταχεία μέθοδος παρασκευής φωτοπρωτεϊνικών ιχνηθετών; Βιοφωταυγάζουσα αντίδραση φωτοπρωτεϊνών παρουσία ιόντων Tb3+; Παραμαγνητικά σφαιρίδια; Συζευγμένη μεταγραφή και μετάφραση in vitro
Χώρα
Ελλάδα
Γλώσσα
Ελληνικά
Άλλα στοιχεία
139 σ., εικ.
Στατιστικά χρήσης
ΠΡΟΒΟΛΕΣ
Αφορά στις μοναδικές επισκέψεις της διδακτορικής διατριβής για την χρονική περίοδο 07/2018 - 07/2023.
Πηγή: Google Analytics.
ΞΕΦΥΛΛΙΣΜΑΤΑ
Αφορά στο άνοιγμα του online αναγνώστη για την χρονική περίοδο 07/2018 - 07/2023.
Πηγή: Google Analytics.
ΜΕΤΑΦΟΡΤΩΣΕΙΣ
Αφορά στο σύνολο των μεταφορτώσων του αρχείου της διδακτορικής διατριβής.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
ΧΡΗΣΤΕΣ
Αφορά στους συνδεδεμένους στο σύστημα χρήστες οι οποίοι έχουν αλληλεπιδράσει με τη διδακτορική διατριβή. Ως επί το πλείστον, αφορά τις μεταφορτώσεις.
Πηγή: Εθνικό Αρχείο Διδακτορικών Διατριβών.
Σχετικές εγγραφές (με βάση τις επισκέψεις των χρηστών)