Απομόνωση και ιδιότητες της ATP διφωσφουδρολάσης από ανθρώπινο πλακούντα

Abstract

ATP diphosphohydrolase (ATP-DPH) is a membrane bound enzyme which hydrolyzes ATP and ADP to AMP in the presence of Mg²⁺or Ca²⁺. The aim of this work was to purify and study the properties of this enzyme from human placenta so as to help in understanding the role of this enzyme. The purification was achieved after solubilization of human placental membrane fraction with Triton X-100 and column chromatography (anion exchange and affinity chromatography). The purified enzyme (Mr=8.2 kDa) was found to be highly glycosylated and localized on plasma membrane.

Η ATP διφωσφοϋδρολάση (ATP-DPH) είναι μεμβρανικό ένζυμο που υδρολύει ATP και ADP προς AMP παρουσία Ca²⁺ ή Mg²⁺. Σκοπός της εργασίας ήταν η απομόνωση και μελέτη του ενζύμου αυτού από τον ανθρώπινο πλακούντα ώστε να βοηθηθεί η κατανόηση του ρόλου του ενζύμου αυτού. Ο καθαρισμός επιτεύχθηκε μετά από διάλυση των μεμβρανών πλακούντα με Triton X-100, και χρωματογραφία ανιονικής ανταλλαγής και συγγένειας. Το απομονωμένο ένζυμο (Μr=82 kDa) βρέθηκε γλυκοζυλιωμένο, και εντοπίστηκε στην εξωτερική κυτταρική μεμβράνη.