ΠΡΩΤΕΙΝΕΣ ΜΕ ΦΩΣΦΟΡΙΚΗ ΤΥΡΟΣΙΝΗ ΣΤΟ ΕΝΤΟΜΟ CERATITIS CAPITATA: ΕΚΦΡΑΣΗ ΚΑΙ ΠΙΘΑΝΟΣ ΛΕΙΤΟΥΡΓΙΚΟΣ ΡΟΛΟΣ ΚΑΤΑ ΤΗΝ ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΤΟΥ ΕΝΤΟΜΟΥ

Abstract

Η ΕΡΓΑΣΙΑ ΑΥΤΗ ΠΡΟΣΠΑΘΕΙ ΝΑ ΠΕΡΙΓΡΑΨΕΙ ΤΟΥΣ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟΥΣ ΤΗΣ ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΣΗΣ - ΑΠΟΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΣΗΣ ΤΩΝ ΠΡΟΤΕΙΝΩΝ ΣΤΗΝ ΤΥΡΟΣΙΝΗ, ΚΑΤΑ ΤΟ ΤΡΙΤΟ ΠΡΟΝΥΜΦΙΚΟ ΣΤΑΔΙΟ ΑΝΑΠΤΥΞΗΣ ΤΟΥ ΕΝΤΟΜΟΥ CERATITIS CAPITATA ΣΤΟΝ ΙΣΤΟ ΤΟΥ ΕΠΙΔΕΡΜΙΔΙΟΥ. ΠΑΡΑΛΛΗΛΑ ΓΙΝΕΤΑΙ ΔΙΕΡΕΥΝΗΣΗ ΤΩΝ ΜΟΡΙΑΚΩΝ ΜΗΧΑΝΙΣΜΩΝ ΔΙΑΒΙΒΑΣΗΣ ΤΟΥ ΕΞΩΚΥΤΤΑΡΙΚΟΥ ΣΗΜΑΤΟΣ ΑΠΟ ΤΟ ΒΑΚΤΗΡΙΑΚΟ ΛΙΠΟΠΟΛΥΣΑΚΧΑΡΙΤΗ ΣΤΟ ΕΣΩΤΕΡΙΚΟ ΤΩΝ ΑΙΜΟΚΥΤΤΑΡΩΝ. ΕΓΙΝΕΧΡΗΣΗ ΒΙΟΧΗΜΙΚΩΝ ΤΕΧΝΙΚΩΝ ΓΙΑ ΤΗΝ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ IN VITRO ΚΑΙ IN VIVO ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΣΗΣ ΤΩΝ ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ. Η ΜΕΛΕΤΗ ΤΩΝ ΦΩΣΦΟΤΥΡΟΣΥΛΙΩΜΕΝΩΝ ΠΡΩΤΕΙΝΩΝ ΕΓΙΝΕ ΜΕ ΧΡΗΣΗ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΕΝΑΝΤΙ ΦΩΣΦΟΡΙΚΗΣ ΤΥΡΟΣΙΝΗΣ, ΚΑΘΩΣ ΚΑΙ ΜΕ ΤΗ ΣΗΜΑΣΗ ΤΟΥΣ ΜΕ ^32P. ΔΙΑΠΙΣΤΩΘΗΚΕ ΟΤΙ ΣΤΟΝ ΙΣΤΟ ΤΟΥ ΕΠΙΔΕΡΜΙΔΙΟΥ Η ΠΡΩΤΕΙΝΗ P54 ΕΙΝΑΙ ΕΝΑ ΠΙΘΑΝΟ ΦΥΣΙΟΛΟΓΙΚΟ ΥΠΟΣΤΡΩΜΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΕΝΔΟΓΕΝΗ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑ ΦΩΣΦΑΤΑΣΗΣ. Η P54 ΑΚΟΛΟΥΘΕΙ ΕΝΑ ΑΝΑΠΤΥΞΙΑΚΑ ΡΥΘΜΙΖΟΜΕΝΟ ΠΡΟΓΡΑΜΜΑ ΣΥΣΣΩΡΕΥΣΗΣ ΚΑΙ ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΣΗΣ ΣΤΗΝ ΤΥΡΟΣΙΝΗ, ΜΕ ΜΕΓΙΣΤΟ ΣΤΙΣ ΑΡΧΕΣ ΤΟΥ ΤΡΙΤΟΥ ΣΤΑΔΙΟΥ. ΣΤΟ ΙΔΙΟ ΣΤΑΔΙΟ ΠΙΣΤΟΠΟΙΗΘΗΚΕ ΚΑΙ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΗΚΕ Η ΠΑΡΟΥΣΙΑ ΕΝΕΡΓΟΤΗΤΑΣ ΠΡΩΤΕΙΝΙΚΗΣ ΚΙΝΑΣΗΣ ΤΥΡΟΣΙΝΗΣ, ΤΗΣ ΟΠΟΙΑΣ Η ΚΑΤΑΛΥΤΙΚΗ ΥΠΟΜΟΝΑΔΑ ΕΙΝΑΙ 90 ΚDA. Η ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ ΑΙΜΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΑΠΟ ΤΟ ΛΙΠΟΠΟΛΥΣΑΚΧΑΡΙΤΗ (LPS), ΠΡΟΥΠΟΘΕΤΕΙ ΤΗ ΦΩΣΦΟΡΥΛΙΩΣΗ ΤΩΝ ΠΟΛΥΠΕΠΤΙΔΙΩΝ P19 ΚΑΙ P22. Η ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΣΗ ΤΩΝ ΑΙΜΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΣΥΝΟΔΕΥΤΑΙ ΑΠΟ ΤΗΝ ΕΚΚΡΙΣΗ ΒΙΟΛΟΓΙΚΑ ΕΝΕΡΓΩΝ ΜΟΡΙΩΝ ΠΟΥ ΣΥΜΜΕΤΕΧΟΥΝ ΣΤΙΣ ΑΝΟΣΟΑΝΤΙΔΡΑΣΕΙΣ. ΤΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΑΥΤΟ ΠΑΡΟΥΣΙΑΖΕΤΑΙ ΑΝΑΛΟΓΟ ΜΕ ΤΟ ΣΥΣΤΗΜΑ ΤΩΝ ΜΑΚΡΟΦΑΓΩΝ ΣΤΑ ΘΗΛΑΣΤΙΚΑ, ΣΤΟΙΧΕΙΟ ΠΟΥ ΥΠΟΔΗΛΩΝΕΙ ΤΗ ΣΥΝΤΗΡΗΤΙΚΗ ΔΙΑΤΗΡΗΣΗ ΤΩΝ ΣΥΣΤΗΜΑΤΩΝ ΜΕΤΑΦΟΡΑΣ ΕΞΩΚΥΤΤΑΡΙΚΟΥ ΣΙΝΙΑΛΟΥ ΑΠΟ ΤΟ ΛΙΠΟΠΟΛΥΣΑΚΧΑΡΙΤΗ.

IN THE PRESENT THESIS WE STUDIED THE PROTEIN TYROSINE PHOSPHORYLATION - DEPHOSPHORYLATION IN THE INTEGUMENT, HAEMOCYTES AND FAT BODY, DURING THE 3RD LARVALINSTAR OF THE MEDFLY CERATITIS CAPITATA, WITH EMPHASIS ON THE STUDY OF INTEGUMENTAL PROTEIN KINASE PHOSPHATASE ENZYME ACTIVITY. WE PURIFIED AND DEFINED THE DEVELOPMENTAL PROFILE OF P54 PROTEIN, WHICH IS PROBABLY THE IN VIVO SUBSTRATE OF THE ABOVE MENTIONED ENZYMES. WE ALSO STUDIED THE IN VIVO AS WELL AS THE IN VITRO PHOSPHORYLATION OF INTEGUMENTAL PROTEIN. WE FOUND A DEVELOPMENTALLY REGULATED PHOSPHORYLATION, REACHING A PEAK IN THE BEGINING OF THE THIRD LARVAL MSTAR. THE DEVELOPMENTALLY REGULATED BIOSYNTHESIS AND PHOSPHORYLATION OF P54 PROTEIN PROBABLY INDICATE A ROLE AS REGULATOR OF EPIDERMAL CELL METABOLISM RATHER THAN A SPECIFIC REGULATOR WITH DEFINED ROLE DURING CERTAIN DEVELOPMENTAL STAGE. AN OTHER TISSUE STUDIED WAS THE HAEMOCYTES, INTERWEAVING IN THE INSECT DEFENSE SYSTEM. WE STUDIED THE SIGNAL TRANSDUCTION DUE TO LPS. WE FOUND THAT LPS INDUCES THE HAEMOCYTE PROTEIN TYROSINE PHOSPHORYLATION, SOMETHING WELLKNOWN FOR THE VERTEBRATE MACROPHAGES. THIS ACTION IS RELATED WITH THE SECRETION OF BIOLOGICALLY ACTIVE MOLECULES, PART OF THEM INVOLVING IN DEFENSE MECHANISMS.