Διερεύνηση της έκφρασης των ογκογονιδίων RAS, C-MYC, της πρωτεΐνης LMP-1 ΚΑΙ ΤΩΝ EBER 1/2 mRNAS του ιού EPSTEIN-BARR και του πυρηνικού αντιγόνου κυτταρικού πολλαπλασιασμού σε λεμφώματα της παιδικής ηλικίας

Abstract

Paraffin sections from 21 cases of Hodgkin's Disease (HD), 23 cases of non-Hodgkin's lymphomas (NHL) and 34 cases of reactive lymphadenitides in children aged from 3-5 years old and followed in the Department of Pediatric Hematology-Oncology, were examined for the expression of pan-ras, c-myc, PCNA and LMP-1, using the method of immunostaining. Additionally, the same samples were investigated for the presence of EBER 1/2 EBV-mRNAs, using the method of RNA in situ hybridization and for the detection of codon 12 point mutations of N-ras and K-ras, using the polymerase chain reaction technique (PCR), combined with RFLP analysis. Ras-p21 protein was hardly expressed in all cases that were examined. Codon 12 point mutation of N-ras was detected in only one case of NHL, while codon 12 point mutation of K-ras was not found at all. Myc-p62 protein was frequently detected in all cases of lymphomas and mainly in HD. LMP-1 was found in 57% cases of HD, but in none of the NHL cases and of reactive lymphadenitides included in the study. LMP-1 reactivity was restricted to Hodgkin's and Reed Sternberg cells. EBER 1/2 mRNAs were detected in RS cells in 57% cases of HD. In NHL and in reactive lymphadenitides EBER 1/2 were found only in a few non-neoplastic cells. All cases of HD and NHL showed PCNA reactivity, with a considerable variation of proliferation rate among different subtypes of both groups. The above results suggest that c-myc oncogene rather than ras is implicated in the pathogenesis of childhood lymphomas. In more than half of the HD cases studied Epstein Barr virus seemed to be involved, while the PCNA index could be helpful in all childhood lymphomas in order to assess their proliferating capacity.

Εξετάστηκαν τομές παραφίνης λεμφαδένων από 21 περιπτώσεις νόσου του Hodgkin (HD), 23 περιπτώσεις λεμφωμάτων μη-Hodgkin και 34 περιπτώσεις αντιδραστικών λεμφαδενίτιδων, παιδιών ηλικίας από 3-15 χρόνων, που παρακολουθούνται στην Κλινική Παιδιατρικής Αιματολογίας-Ογκολογίας του Πανεπιστημιακού Νοσοκομείου Ηρακλείου. Σκοπός της μελέτης ήταν η διερεύνηση της έκφρασης των γονιδίων ras και c-myc, της LMP-1 και του PCNA. Επίσης η αναζήτηση των EBER 1/2 EBVmRNAs και η ανίχνευση μεταλλάξεων των Ν-ras και K-ras, στο κωδικόνιο 12. Χρησιμοποιήθηκαν οι μέθοδοι της ανοσοΐστοχημείας και της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμερισμού (PCR) σε συνδυασμό με RFLP ανάλυση. Η πρωτεΐνη ras-p21 ελάχιστα εκφράζονταν σε όλες τις περιπτώσεις που εξετάστηκαν. Επίσης, μετάλλαξη του N-ras βρέθηκε σε μία μόνο περίπτωση NHL, ενώ μετάλλαξη του K-ras δεν ανιχνεύθηκε σε καμία από τις περιπτώσεις που μελετήθηκαν. Η πρωτεΐνη myc-p62 εκφράζονταν σε μεγάλο αριθμό κυττάρων σε όλες τις περιπτώσεις λεμφωμάτων και κυρίως στην HD. Η πρωτεΐνη LMP-1 ανιχνεύθηκε σε 57% των περιπτώσεων της HD στα κύτταρα Hodgkin και Reed Sternberg (HRS). Αρνητικές για την LMP-1 ήταν όλες οι περιπτώσεις NHL και αντιδραστικών λεμφαδενίτιδων. Τα EBER 1/2 εντοπίσθηκαν, στα κύτταρα RS, σε 57% των περιπτώσεων της HD. Στα NHL και στις αντιδραστικές λεμφαδενίτιδες EBER 1/2 ανιχνεύθηκαν μόνο σε λίγα μη-νεοπλασματικά λεμφοκύτταρα. Το αντιγόνο PCNA εκφράζονταν σε όλες τις περιπτώσεις λεμφωμάτων και παρουσίαζε μεγάλη διακύμανση ανάμεσα στους διαφορετικούς υπότυπους. Συμπερασματικά, το ογκογονίδιο c-myc φαίνεται να συμμετέχει στη λεμφωματογένεση, σε αντίθεση με το ογκογονίδιο ras. Ο ιός Epstein-Barr πιθανώς ενέχεται στην παθογένεια κάποιων περιπτώσεων της HD και το αντιγόνο PCNA μπορεί να χρησιμοποιηθεί σαν δείκτης της βιολογικής συμπεριφοράς των λεμφωμάτων.