ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΚΑΙ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΕΝΟΣ Δ-ΤΥΠΟΥ ΟΠΙΟΕΙΔΟΥΣ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΑΠΟ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΕΓΚΕΦΑΛΟΥ ΤΟΥ ΕΠΙΜΥΟΣ

Abstract

THIS WORK IS AIMING AT THE ISOLATION, BIOCHEMICAL STUDY AND CHARACTERIZATION OFOPIOID RECEPTORS IN RAT CENTRAL NERVOUS SYSTEM USING THREE DIFFERENT BIOLOGICAL PREPARATIONS A) RAT BRAIN SYNAPTOSOMAL MEMBRANES, B) SYNAPTOSOMAL MEMBRANESSOLUBILIZED WITH DOCNA, C) THE ISOLATED RECEPTOR BY AFFINITY CHROMATOGRAPHY WITH THE AFFI-NAL RESIN. THE RESULTS ARE SUMMARIZED BELOW: I) SOLUBILIZATION OF ACTIVE OPIOID RECEPTORS IN HIGH YIELD WITH BINDING PARAMETERS FOR AGONISTS AND ANTAGONISTS WHICH ARE CLOSE TO THOSE OF THE SYNAPTOSOMAL PREPARATION. II) ISOLATION OF ACTIVE RECEPTORS, USING AFFI-NAL AFFINITY CHROMATOGRAPHY, THE BOUNDSELECTIVELY Δ-OPIOID LIGANDS. III) GENERATION OF POLYCLONAL ANTIBODIES AGAINST THE ISOLATED Δ-OPIOID RECEPTOR FOLLOWED BY FURTHER CHARACTERIZATION OF THE RECEPTOR USING THE PARTIALLY PURIFIED ANTIBODIES.

Η ΕΡΕΥΝΗΤΙΚΗ ΑΥΤΗ ΕΡΓΑΣΙΑ ΕΧΕΙ ΣΑΝ ΣΤΟΧΟ ΤΗΝ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ, ΒΙΟΧΗΜΙΚΗ ΜΕΛΕΤΗ ΚΑΙ ΤΟΝ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟ ΤΩΝ ΟΠΙΟΕΙΔΩΝ ΥΠΟΔΟΧΕΩΝ ΤΟΥ ΚΕΝΤΡΙΚΟΥ ΝΕΥΡΙΚΟΥ ΣΥΣΤΗΜΑΤΟΣ ΤΟΥ ΕΠΙΜΥΟΣ. ΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΘΗΚΑΝ ΤΡΙΑ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΑ ΒΙΟΛΟΓΙΚΑ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑΤΑ Α) ΣΥΝΑΠΤΟΣΩΜΙΚΕΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΕΓΚΕΦΑΛΟΥ ΕΠΙΜΥΟΣ, Β) ΔΙΑΛΥΤΟΠΟΙΗΜΕΝΕΣ ΣΥΝΑΠΤΟΣΩΜΙΚΕΣ ΜΕΜΒΡΑΝΕΣ ΜΕ ΤΟ ΑΝΙΟΝΙΚΟ ΑΠΟΡΡΥΠΑΝΤΙΚΟ DOCNA, Γ) ΑΠΟΜΟΝΩΜΕΝΟΣ ΥΠΟΔΟΧΕΑΣ ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑ ΧΗΜΙΚΗΣ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑΣ ΜΕ ΤΗΝ ΡΗΤΙΝΗ AFFI-NAL. ΤΑ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ ΣΥΝΟΨΙΖΟΝΤΑΙ ΠΙΟ ΚΑΤΩ: Ι) ΔΙΑΛΥΤΟΠΟΙΗΣΗ ΕΝΕΡΓΩΝ ΟΠΙΟΕΙΔΩΝ ΥΠΟΔΟΧΕΩΝ ΣΕ ΣΧΕΤΙΚΑ ΥΨΗΛΗ ΑΠΟΔΟΣΗ ΚΑΙ ΜΕ ΣΤΑΘΕΡΕΣ ΠΡΟΣΔΕΣΗΣ ΓΙΑ ΑΓΩΝΙΣΤΕΣ ΚΑΙ ΑΝΤΑΓΩΝΙΣΤΕΣ ΠΟΥ ΠΡΟΣΕΓΓΙΖΟΥΝ ΑΥΤΕΣ ΤΟΥ ΣΥΝΑΠΤΟΣΩΜΙΚΟΥ ΠΑΡΑΣΚΕΥΑΣΜΑΤΟΣ. ΙΙ) ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΕΝΕΡΓΩΝ ΥΠΟΔΟΧΕΩΝ ΜΕ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΙΑ ΧΗΜΙΚΗΣ ΣΥΓΓΕΝΕΙΑΣ AFFI-NAL ΟΙ ΟΠΟΙΟΙ ΔΕΙΧΝΟΥΝ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΣΗ ΣΤΗΝ ΠΡΟΣΔΕΣΗ, Δ-ΟΠΙΟΕΙΔΩΝ. ΙΙΙ) ΑΝΑΠΤΥΞΗ ΠΟΛΥΚΛΩΝΙΚΩΝ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ ΤΟΥ ΑΠΟΜΟΝΩΜΕΝΟΥ Δ-ΟΠΙΟΕΙΔΟΥΣ ΥΠΟΔΟΧΕΑ ΚΑΙ ΠΕΡΑΙΤΕΡΩ ΜΕΛΕΤΗ ΑΥΤΟΥ ΜΕ ΤΗΝ ΧΡΗΣΗ ΤΩΝ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΩΝ.