Ανοσοϊστολογικοί και μοριακοί δείκτες καρκινωμάτων παχέος εντέρου

Abstract

Colorectal carcinoma is the third most common cancer and despite the abundance of molecular pathways and markers continually being reported, the mortality rates remain high.In this retrospective study, 51 cases of primary co¬lon adenocarcinoma were evaluated, for whom archi¬val specimens from the resected primary tumor were available. None of the patients had received chemo¬therapy or radiation before surgery. All surgical spec¬imens were retrieved from the files of the Pathology Department, Faculty of Medicine, School of Health Sciences, University of Thessaly.Tissue sections were stained with BRAFV600 specific clone VE1 antibody, HIF-1α and NF-κΒ and the immunohistochemical expression was correlated to clinicopathological parameters and molecular data regarding BRAF and KRAS mutational analysis. BRAF V600E protein was detected in the cytoplasm of neoplastic cells in 13 of the 51 examined cases (25.5%). The correlation between immunohistochemical staining and DNA sequence analysis for BRAF showed 93.75% sensitivity and 100% specificity. Nuclear HIF-1α immunostaining was detected in 68.62% of the cases. The correlation between positive immunostaining and pathological stage, as well as vascular invasion, showed statistical significance. In addition, statistically significant was the correlation between nuclear immunostaining for NF-κΒ, detected in 58.82% of adenocarcinoma cases and pathological stage and vascular invasion.Our data suggest that immunohistochemistry could be used in rou¬tine clinical practice as a screening method for BRAF V600E mutant protein detection in patients with colorectal carcinoma. Moreover this study delineates the role of HIF-1α and NF-κΒ as possible prognostic biomarkers in colorectal adenocarcinoma.

Ο καρκίνος του παχέος εντέρου αποτελεί την τρίτη αιτία θανάτου παγκοσμίως. Ιστολογικοί δείκτες έχουν προταθεί ως πιθανοί προγνωστικοί και προβλεπτικοί δείκτες για εξατομικευμένες θεραπείες. Η παρούσα μελέτη περιέλαβε αρχειακό υλικό από 51 εγχειρητικά παρασκευάσματα αδενοκαρκινώματος παχέος εντέρου που διαγνώσθηκαν στο Εργαστήριο Παθολογικής Ανατομικής του Πανεπιστημίου Θεσσαλίας. Μελετήθηκε η παρουσία μεταλλάξεων στα ογκογονίδια BRAF και KRAS, καθώς και η ανοσοϊστοχημική έκφραση των πρωτεϊνών BRAF, NF-κΒ και HIF-1α. Αποδείχθηκε στατιστικά σημαντική σχέση μεταξύ της ανοσοϊστοχημικής έκφρασης BRAF VE1 με τη μοριακή ανίχνευση της μετάλλαξης V600E του γονιδίου BRAF. Θετική ανοσοϊστοχημική χρώση για HIF-1α παρατηρήθηκε στο 68,62% των καρκινωμάτων. Η έκφραση του HIF-1α παρουσίασε στατιστικά σημαντική συσχέτιση με την αγγειακή διήθηση και το παθολογοανατομικό στάδιο. Επιπλέον παρατηρήσαμε συχνή πυρηνική έκφραση του μεταγραφικού παράγοντα NF-κΒ (58,82%) και αναδείχθηκε στατιστικά σημαντική συσχέτιση της υπερέκφρασης του NF-κΒ με το παθολογοανατομικό στάδιο του καρκινώματος και την αγγειακή διήθηση. Συμπερασματικά, η παρούσα μελέτη παρέχει πληροφορίες για την μοριακή ανίχνευση των μεταλλάξεων των γονιδίων KRAS και BRAF στο αδενοκαρκίνωμα του παχέος εντέρου στον ελληνικό πληθυσμό αλλά και για την αξία της ανοσοϊστοχημικής αναζήτησης της BRAFV600E πρωτεΐνης ως εναλλακτικής μεθόδου για την επιλογή των ασθενών. Επιπλέον, η μελέτη παρέχει ενδείξεις για το ρόλο των παραγόντων HIF-1α και NF-κΒ που εμπλέκονται στον καρκίνο του παχέος εντέρου και φαίνεται να συσχετίζονται με δυσμενείς κλινικοπαθολογοανατομικές προγνωστικές παραμέτρους. Τα ανωτέρω ευρήματα υποδεικνύουν τη σημασία των συγκεκριμένων παραγόντων ως πιθανών προγνωστικών βιοδεικτών για τον καρκίνο του παχέος εντέρου, ενώ περαιτέρω κλινικές μελέτες απαιτούνται για την πλήρη αποσαφήνιση των μηχανισμών που ρυθμίζουν το ρόλο τους ως δυνητικούς θεραπευτικούς στόχους.