Παράγοντες αθηροσκλήρωσης σε πειραματόζωα ομόζυγα για την έλλειψη του γονιδίου της απολιποπρωτεΐνης Ε (Apo-E)

Abstract

Introduction: Atherosclerosis is a major risk factor for coronary artery disease, but theclassic and the nonmodifiable risk factors cannot fully explain the variation in anatomicextent and development of atherosclerosis . Therefore, many emerging risk factors havebeen investigated such as folic acid. The effect of folic acid in the immune system,particularly the regulation of the balance of the immune response has not yet beeninvestigated sufficiently.Aim: To investigate the effect of dietary supplementation of a high dose folic acid in anexperimental model of hypercholesterolemia and accelerated atherosclerosis. We tent tostudy the effect of folic acid in the immune response and lipid profile of animals and theatherosclerotic burden.Research Methods: Male ApoE (- / -) mice fed from forth week with a typical dietreceived either water (control group-group1) or an aqueous solution of folic acidcontaining a dose of 75mcg / kg / day (study group-group2), for sixteen weeks. Similarly,two additional groups of rats received either water (group3) or folic acid (group4) and adiet rich in cholesterol (0.25% cholesterol, 15% vegetable fat). In these 4 study groups wemeasured total cholesterol (CHOL), the low density lipoprotein (LDL), the high-densitylipoprotein (HDL) and triglycerides (TGL) in plasma at the time of the killing of animalsas indicators of lipid cargo , and immunomodulatory actions of folic acid were examined inrelation to the levels of IL-6, IL-10. We measured plasma levels of Hcy. Finally wemeasured the lesion severity on aortic root of animals.Results: The addition of folic acid resulted in decreased production of IL-6 as anantioxidant effect of folic acid. . On the other hand we observed no significant difference in IL-10 in plasma of mice treated with folic acid. Mice fed with WD had no significantdifference in IL-6 and IL-10 plasma levels when treated with FA. Moreover we found adecrease in TC and LDL- cholesterol when folic acid was added to the diet . Serum levelsof Hcy were significantly lower when folic acid was supplemented. Finally FAsupplementation decreased plaque size on aortic roots of the animals.Conclusions: Overall, folic acid has a beneficial effect on the metabolism of LDLcholesterol and total cholesterol levels, The HDL and TGL appears not to have substantialdifferences, at least in this model of atherosclerosis. Finally, the exogenous administrationof folic acid reduces the atherosclerotic burden in ApoE (- / -) mice and has beneficialeffects on the plasma levels of Hcy . Finally, treatment with FA exert a major impact onatherosclerotic plaque development.

Εισαγωγή: ΤΟ φυλλικό οξύ είναι μια βιταμίνη που όταν χρησιμοποιείται ως διαιτητικό συμπλήρωμα μπορεί να βελτιώσει την λειτουργία του ενδοθηλίου. Όμως οι πρόσφατες μεγάλες τυχαιοποιημένες κλινικές μελέτες απέτυχαν να τεκμηριώσουν το όφελος του φυλλικού οξέος στην κλινική έκβαση των ασθενών με αθηροσκλήρωση. Η σχέση του φυλλικού οξέος με τον ανοσολογικό μηχανισμό και ιδιαίτερα η ρύθμιση της ισορροπίας της ανοσολογικής απάντησης δεν έχει διερευνηθεί επαρκώς. ΣΚΟΠΟΣ:. Η μελέτη της επίδρασης του φυλλικού οξέος στο λιπιδαιμικό προφίλ, τον ανοσολογικό μηχανισμό και το αθηρωματικό φορτίο των πειραματόζωων.Υλικό και μέθοδος: Αρσενικά ApoE ( - / - ) πειραματόζωα που που ανατράφηκαν μέχρι την τέταρτη βδομάδα με δίαιτα ανάπτυξης τυχαιοποιήθηκαν σε τέσσερις ομάδες. Στην πρώτη ομάδα ελέγχου έλαβαν είτε το νερό ή υδατικό διάλυμα του φυλλικού οξέος που περιείχε μια δόση των 75mcg / kg / ημέρα ( δεύτερη ομάδα μελέτης, για δεκαέξι εβδομάδες. Αντίστοιχα, δύο επιπλέον ομάδες πειραματόζωων έλαβαν είτε νερό ( ομάδα τρίτη) είτε φυλλικό οξύ ( ομάδα τέσσερα) και δίαιτα με υψηλής περιεκτικότητα σε λιπαρά και χοληστερόλης ( 21 % λίπος και 1,25 % χοληστερίνη ) - διατροφή δυτικού τύπου( WD). Στις 4 αυτές ομάδες μελέτης μετρήθηκαν η ολική χοληστερόλη ( TC), η λιποπρωτείνη χαμηλής πυκνότητας ( LDL) , η λιποπρωτείνη υψηλής πυκνότητας ( HDL) και τα τριγλυκερίδια ( TGL) του πλάσματος κατά τη στιγμή της ευθανασίας των πειραματόζωων,ως δείκτες του λιπιδαιμικού φορτίου τους, ενώ οι ανοσοτροποποιητικές δράσεις του φυλλικού οξέος εξετάστηκαν σε σχέση με τα επίπεδα της IL-6 και της IL-10 στον ορό.Τέλος μετρήθηκαν τα επίπεδα της Hcy του πλάσματος των πειραματόζωων. Αποτελέσματα: Στο τέλος της περιόδου των 16 εβδομάδων για την ομάδα των πειραματόζωων που τρέφονταν με κανονική διατροφή (ομάδα 1) η προσθήκη φυλλικού οξέως (ομάδα 2 ) μείωσε τα επίπεδα της IL-6 . Δεν υπήρξε διαφορά στα επίπεδα της IL -10 μεταξύ των πειραματόζωων που έλαβαν κανονική διατροφή και εκείνων που έλαβαν θεραπεία με κανονική διατροφή και FA. Στα πειραματόζωα που τρέφονταν με WD (ομάδα 3) , η θεραπεία με FA (ομάδα 4 ) δεν έχει καμία επίπτωση στα επίπεδα της IL - 6 ούτε στα επίπεδα της IL - 10. Στο τέλος της περιόδου των 16 εβδομάδων τα πειραματόζωα που τρέφονταν με κανονική διατροφή (ομάδα 1 ) η θεραπεία FA (ομάδα 2 ) οδήγησε σε μειωμένα επίπεδα Hcy. Ομοίως , στα ποντίκια που τρέφονταν με WD ( ομάδα 3 ) , η θεραπεία FA (ομάδα 4 ) μείωσε τα επίπεδα της HCY. Τέλος η προσθήκη FA οδήγησε σε μειωμένα επίπεδα TC και της LDL- χοληστερόλης. Δεν παρατηρήθηκε καμία διαφορά μεταξύ των ομάδων 1 και 2 στα επίπεδα της HDL-χοληστερόλης και στα επίπεδα των TG.Στα πειραματόζωα που τρέφονταν με WD (ομάδα 3 ) η προσθήκη FA (ομάδα 4 ) εμπόδισε την ανάπτυξη αθηρωματικής πλάκας με αποτέλεσμα τη σημαντικά μικρότερη περιοχή αθηροσκληρωτικής πλάκας.Συμπεράσματα Συνολικά, τα ευρήματα της μελέτης μας δείχνουν μια ευνοϊκή επίδραση του FA στον μεταβολισμό των λιποπρωτεινών . Το πείραμα μας παρέχει αποδείξεις ότι η εξωγενής χορήγηση φυλλικού οξέος μειώνει την αθηροσκλήρωση σε ApoE (-/-)πειραματόζωα, και τα επίπεδα της ομοκυστεΐνης του πλάσματος. Αν και περισσότερες μελέτες απαιτούνται, η προσθήκη φυλλικού οξέως σε λειτουργικά τρόφιμα θα μπορούσε να αποτελέσει ένα σημαντικό μέσο για τη μείωση του αθηρωματικού φορτίου.