Συσχετισμός της έκφρασης των πρωτεϊνών Bax και Bak με την παρουσία DNA των υψηλού κινδύνου ιών HPV

Abstract

The human papilloma virus is known to be related to the development of squamous epithelium dysplasia and carcinoma of the uterine cervix. However, the factors interacting with the virus for the development of dysplasia and cancer are still under investigation. The proapoptotic proteins Bax and Bak, key regulators of the intrinsic apoptotic pathway in the human cells, are included among them. The aim of this thesis is to investigate whether there is a correlation between the expression of the proapoptotic proteins Bax and Bak in the cervical squamous cells and the presence of high-risk HPV DNA or the cytological diagnosis (normal/abnormal Pap test). Methods: 120 cervicovaginal samples of liquid-based cytology were subtyped for the various HPV serotypes and then immunocytochemically stained for the Bax and Bak proteins, whose expression was assessed after microscopy of at least 1000 cells per sample. This was followed by statistical comparison of their expression between women HPV positive and HPV negative, with low and high-risk HPV subtypes and with normal and abnormal Pap test. Results: The statistical analysis showed a correlation of marginal statistical significance between prevalent negative Bax stain and normal Pap test (p=0,074). No other statistically significant differences in the expression of Bax and Bak were found among the rest of the examined subgroups. Conclusion: A weak tendency for negative prevalent Bax stain in women with normal Pap test was observed. Although this correlation is not definitive, it is an indication that further studies on a larger number of specimens might reveal some association between the expression of Bax and the development of dysplasia or cancer of the cervical squamous epithelium.

Ο ιός του ανθρώπινου θηλώματος (HPV) είναι γνωστό ότι σχετίζεται με την δυσπλασία και τον καρκίνο του πλακώδους επιθηλίου του τραχήλου της μήτρας. Εντούτοις, οι παράγοντες που αλληλεπιδρούν με τον ιό για την ανάπτυξη δυσπλασίας και καρκίνου τελούν ακόμα υπό διερεύνηση. Μεταξύ αυτών συγκαταλέγονται οι προαποπτωτικές πρωτεΐνες Bax και Bak, βασικοί ρυθμιστές της ενδογενούς αποπτωτικής οδού στα κύτταρα. Σκοπός της παρούσας διδακτορικής διατριβής είναι να διερευνηθεί αν υπάρχει συσχέτιση μεταξύ της έκφρασης των προαποπτωτικών πρωτεϊνών Bax και Bak στα πλακώδη κύτταρα του τραχήλου και της παρουσίας DNA των υψηλού κινδύνου ιών HPV ή της κυτταρολογικής διάγνωσης (φυσιολογικό/παθολογικό τεστ Παπανικολάου). Μέθοδοι: Σε 120 κολποτραχηλικά δείγματα κυτταρολογίας υγρής φάσης έγινε HPV τυποποίηση και ανοσοκυτταροχημική χρώση έναντι των πρωτεϊνών Bax και Bak, των οποίων η έκφραση αξιολογήθηκε μετά από μικροσκόπηση τουλάχιστον 1000 κυττάρων. Ακολούθησε στατιστική σύγκριση της έκφρασής τους μεταξύ γυναικών αρνητικών και θετικών για HPV, με χαμηλού και υψηλού κινδύνου HPV υπότυπους και με φυσιολογικό και παθολογικό τεστ Παπανικολάου. Αποτελέσματα: Η στατιστική ανάλυση ανέδειξε μια οριακής στατιστικής σημαντικότητας συσχέτιση μεταξύ της αρνητικής επικρατούσας έντασης χρώσης Bax και του φυσιολογικού τεστ Παπανικολάου (p=0,074). Δεν βρέθηκαν στατιστικά σημαντικές διαφορές στην έκφραση των Bax και Bak μεταξύ των υπολοίπων υποομάδων. Συμπέρασμα: Παρατηρήθηκε μια ασθενής τάση για αρνητική χρώση Bax σε γυναίκες με φυσιολογικό τεστ Παπανικολάου. Μολονότι η συσχέτιση αυτή δεν είναι αποδεικτική, αποτελεί μια ένδειξη ότι περαιτέρω μελέτες σε μεγαλύτερο αριθμό δειγμάτων θα μπορούσαν να αποκαλύψουν κάποιο συσχετισμό της έκφρασης του Bax με την ανάπτυξη δυσπλασίας και καρκίνου του πλακώδους επιθηλίου του τραχήλου.