Υποξαιμική ανάταξη του αιμορραγικού shock: πειραματική μελέτη βασικών μηχανισμών δράσης

Abstract

The present study was designed to investigate whether serum ofanimals subjected to hypoxemic resuscitation from haemorrhagic shock maybe a weak stimulant for monocytes or not. Twenty rabbits were subjected tohaemorrhagic shock after blood exsanguination; resuscitation was performedby infusion of the shed blood in eight rabbits under normoxemic conditions(NormoxRes) and in twelve under hypoxemic conditions (HypoxRes); sevenrabbits were subjected to sham operation. Malondialdehyde (MDA) andtumour necrosis factor (TNF)-a levels were estimated in serum at serial timeintervals; the serum was applied for stimulation of U937 monocytes with orwithout the p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) inhibitor SB203580.Expression of triggering receptor expressed on myeloid cells-1 (TREM-1) onU937 was also assessed by flow cytometric analysis. Death supervened infour animals of the NormoxRes (50%) and in one animal of the HypoxResgroup (8·33%, P: 0·032). Serum levels of TNF-a and MDA were higher inNormoxRes compared to HypoxRes animals. Expression of TREM-1 on U937monocytes was similar after stimulation with serum sampled from bothgroups. Concentrations of interleukin (IL)-1b, IL-6 and IL-8 of monocytessupernatants were higher after stimulation with serum of NormoxRes thanHypoxRes rabbits. Production of cytokines after stimulation with serum wasdecreased significantly after addition of SB203580. It is concluded thatstimulation of monocytes may contribute to the generation of the systemicinflammatory response during reperfusion after ischemia. Lower stimulation ofthe p38 MAPK-mediated production of IL-1b, IL-6 and IL-8 by monocytes may112be implicated as an explanation for the benefits shown for the host whenresuscitation is performed under hypoxemic conditions

Σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν να μελετήσουμε την επίδρασητης υποξαιμικής ανάταξης του αιμορραγικού shock στη διέγερση τωνμονοκυττάρων και στην επακόλουθη συστηματική φλεγμονώδη απάντηση. Τουλικό της μελέτης αποτέλεσαν είκοσι επτά κόνικλοι. Είκοσι εξ αυτών,υποβλήθηκαν σε αιμορραγικό shock μέσω αφαίμαξης. Ακολούθησε ανάταξη ηοποία πραγματοποιήθηκε μέσω της χορήγησης του προηγούμενασυλλεγχθέντος αίματος υπό συνθήκες νορμοξαιμίας (ομάδα NormoxRes) σεοκτώ κόνικλους και υπό συνθήκες υποξαιμίας (ομάδα HypoxRes) σε δώδεκακόνικλους. Οι υπόλοιποι επτά κόνικλοι αποτέλεσαν την ομάδα ελέγχου(ομάδα Sham), οι οποίοι υποβλήθηκαν σε όλους τους πειραματικούςχειρισμούς με εξαίρεση την αφαίμαξη. Ο ορός των πειραματοζώων σεδιάφορες χρονικές στιγμές χρησίμευσε για τον προσδιορισμό δεικτών τουοξειδωτικού και φλεγμονώδους stress όπως η μαλονδιαλδεϋδη (MDA) και οπαράγοντας νέκρωσης των όγκων – α (Tumor Necrosis Factor TNF - α).Ακολούθως ο ορός από τα πειραματόζωα χρησιμοποιήθηκε για τη διέγερσητων μονοκυττάρων της σειράς U937 με και χωρίς την παρουσία τουπαράγοντα SB203580 ο οποίος είναι αναστολέας της p38 MAP κινάσης.Επίσης μετρήθηκε με τη χρήση κυτταρομετρίας ροής η έκφραση TREM-1(triggering receptor expressed on Myeloid cells-1). Τέσσερα ζώα από τηνομάδα NormoxRes (ποσοστό 50%) και ένα ζώο από την αμάδα HypoxRes(ποσοστό 8,33%, P=0,032) πέθαναν. Τα επίπεδα του TNF - α και της MDAήταν υψηλότερα στον ορό των ζώων της ομάδας NormoxRes συγκριτικά μετην ομάδα Hypox-Res. Η έκφραση του TREM-1 στα μονοκύτταρα της σειράςU937 ήταν παρόμοια μετά διέγερση με ορό και από τις δύο ομάδες110πειραματοζώων. Οι συγκεντρώσεις των ιντερλευκινών IL-1β, IL-6 και IL-8 σταυπερκείμενα των μονοκυττάρων ήταν υψηλότερες μετά διέγερση με ορό απότους κόνικλους της ομάδας NormoxRes σε σχέση με την ομάδα HypoxRes. Ηπαραγωγή των κυτταροκινών μειώθηκε σημαντικά μετά την προσθήκη τουSB203580. Συμπερασματικά θα μπορούσε να υποστηριχτεί ότι η διέγερσητων μονοκυττάρων μπορεί να συμβάλλει στην επαγόμενη συστηματικήφλεγμονώδη απάντηση λόγω του συνδρόμου ισχαιμίας – επαναιμάτωσης. Ημικρότερη παραγωγή των IL-1β, IL-6 και IL-8 από τα μονοκύτταρα, η οποίαδιαμεσολαβείται μέσω του μονοπατιού της p38 MAP κινάσης θα μπορούσε ναθεωρηθεί ως μια εξήγηση για την ευνοϊκή επίδραση της υποξαιμικής ανάταξηςτου αιμορραγικού shock.