Μοριακή μελέτη παραγόντων που σχετίζονται με θρόμβωση και συσχέτισή τους με κληρονομική προδιάθεση για καρκίνο του στόματος

Abstract

Introduction Carcinogenesis is a genetic disease at the cellular level. It is a case of irreversible loss of gene regulation, which controls growth and differentiation. This event is due to changes in DNA and the cancer cells show uncontrolled mitotic activity, which makes these cells to look more like immature cells rather than normal mature differentiated cell types, since they produce proteins found in embryonic cells. In every normal cell there is a normal level for protein production. Disruption of gene regulation and expression because of mutations or DNA polymorphisms may change the normal protein level. Like other types of cancer, oral squamous cell carcinoma (OSCC) is related to the coagulation system. Thromboembolism is one of the most frequent causes of death in patients with cancer. It is therefore clear that such complications occur as the cancer cells have participated in almost all factors of the haemostatic system. Given the above, in this dissertation mutations or polymorphisms were studied in genes whose protein products are associated with a) blood clotting (methyletetrahydrofolare reductase, factor V, prothrombin, factor XII, factor XIII, protein Z), b) the fibrinolysis system (plasminogen activator inhibitor-1, thrombin activated fibrinolysis inhibitor) and c) the renin-angiotensin system (angiotensin converting enzyme, angiotensinogen). Materials and Methods The C677T mutation in Methyletetrahydrofolate reductase gene (MTHFR), the Leiden mutation in the gene of factor V (FV), the G20210A mutation in the Prothrombin gene (PT), the C46T polymorphism in the gene of Factor XII (FXII), the V34L polymorphism in the gene of Factor XIII (FXIII), the polymorphism -13A/G in the Protein Z gene (PZ), the 4G/5G insertion/deletion polymorphism in the Plasminogen Activator Inhibitor-1 gene (PAI-1), the polymorphism 1040 C/T in the Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor gene (TAFI), the insertion/deletion polymorphism in Angiotensin-Converting Enzyme gene (ACE) and the M235T polymorphism in Angiotensinogen gene (AGT) were studied in 163 DNA samples from patients with oral squamous cell carcinoma and 168 samples from healthy controls with corresponding age and gender. Results For the C677T polymorphism in MTHFR gene the data of the present study revealed a statistically significant increase of T allele heterozygotes in the patients group (P= 0,043). This result seems to arise only in the subgroup of patients with a history of thrombophilia where the heterozygotes for the T allele was also significantly increased (P = 0,034). The overall data obtained for the Leiden mutation in the FV gene and the G20210A mutation in the PT gene revealed no statistically significant differences in the comparisons made between the control group and the patient’s group and subgroups. The overall data obtained for the C46T polymorphism of the FXII gene revealed a statistically significant reduction in homozygous patients P=0,008. Similarly statistically significant reductions of heterozygotes occurred in subgroups of patients with advanced stage of cancer, family history of thrombophilia and without tobacco abuse, always in relation to the control group. In the group of healthy controls (N = 135), the V34L mutation in the gene of FXIII was found in 6 homozygotes (4.44%) and 48 heterozygotes (35.56%), while in the group of patients (N = 130) there were 12 homozygotes (9.23%) and 62 heterozygotes (47.69%). This data reveals an incriminatory role for the L allele in the development of OSCC. The same pattern appears in the subgroups of patients with early cancer stage, without family history of cancer, without family history of thrombophilia, without tobacco abuse and without alcohol abuse. For the polymorphism-13A / G in the PZ gene, no statistically significant differences were shown between the group of healthy controls and the group of patients. The same picture appeared in the comparisons made between healthy controls and the various subgroups of patients. For the 4G/5G insertion/deletion polymorphism of the PAI-1 gene the overall data revealed statistically significant increase of homozygotes and heterozygotes in the patient group (P=0,001 and P=0,009 respectively) compared to the control group. This appearance of 4G allele as an incriminatory factor is confirmed by various subgroups of patients. Specifically, by the subgroup of patients with early stage of cancer, the subgroup of patients without family history of cancer, the subgroup of patients without family history of thrombophilia, the subgroup of patients with tobacco abuse and the subgroup of patients without alcohol abuse. For the polymorphism 1040C/T in the TAFI gene, in the group of healthy controls (N = 138), the mutant T allele was found in 18 homozygotes (13.04%) and 66 heterozygous (47.83%), while in patients group (N = 150) the homozygotes were 8 (5.33%) and the heterozygotes 70 (46.67%). These figures reveal a significant reduction in homozygotes (P = 0,018), while the values of OR=0,29 (less than one) and 95% CI (0,11-0,74) assign to this particular allele a protective role against the development of OSCC. This protective role of the T allele was reflected in the comparisons that took place between healthy controls and the homozygotes in the subgroups of patients with advanced cancer stage, with tobacco abuse, without tobacco abuse and without alcohol abuse. For the insertion/deletion polymorphism in the ACE gene this study revealed a statistically significant increase of homozygotes in the patients group compared with the control group. This increase of homozygotes is also reflected in the comparisons occurred between healthy controls and homozygotes in the subgroups of patients with early stage of cancer, with advanced stage of cancer, without family history of cancer, without family history of thrombophilia, without tobacco abuse and without alcohol abuse. For the M235T polymorphism of AGT gene the overall data of this study showed that the prevalence of 'mutant' high expression T allele was not significantly different in the total patient’s group and almost in any of the subgroups, compared to healthy controls. Only in the subgroup of patients with a family history of cancer the homozygotes and the heterozygotes are significantly higher than in the control group. The findings of the multivariate logistic regression for the overall cancer stages of OSCC of model A (mutant homozygotes) highlight as important independent factors in tumor development: a) age, b) gender, c) the genotype I/I of the I/D polymorphism in the ACE gene and d) the 4G/4G genotype of the 4G/5G polymorphism in the PAI-1 gene, while the same model for the early and late stages of OSCC includes only the first three factors. Model B (mutant heterozygotes) for the overall stages of OSCC highlights as important independent factors in tumor development: a) age, b) sex and c) the 4G/5G genotype of the -675 4G/5G polymorphism in the PAI-1 gene. The same model for the early stages of OSCC includes a) age, b) sex and also c) heterozygotes for the C677T polymorphism in the MTHFR gene. Finally, in the late stages of OSCC Model B includes the factors a) age, b) sex and also c) heterozygotes of the C46T polymorphism in the FXII gene, and d) heterozygotes of the V34L polymorphism in the FXIII gene. Model C (inheritance mode of mutations) shows as significant independent determinants of growth of tumor in the mouth: a) age, b) sex and c) the genotype I/I of the I/D polymorphism in the ACE gene. Conclusions Of the total 10 polymorphisms or mutations investigated in this study 3 did not show any correlation with the development of OSCC, 2 shows moderate correlation, 2 have a protective effect and 3 are closely related with the development of OSCC. Leiden mutation in the gene of factor V (FV), G20210A mutation in prothrombin gene (PT) and the -13A/G polymorphism in the gene of protein Z (PZ) does not affect oral oncogenesis. The C677T polymorphism in the gene of methyletetrahydrofolate reductase (MTHFR) and the M235T polymorphism in the angiotensinogen (AGT) gene demonstrated mild incriminatory role in the oral cavity oncogenesis. The mutant alleles of the C46T polymorphism in the gene of Factor XII (FXII) and the 1040C/T polymorphism in the thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI) have a protective effect in terms of OSCC development. The V34L polymorphism in the gene of factor XIII (FXIII), the 4G/5G polymorphism in the plasminogen activator inhibitor -1 gene (PAI-1) and the insertion/deletion polymorphism in the angiotensin-converting enzyme (ACE) gene are closely related with the development of OSCC. Model A (mutant homozygotes) for the overall stages of OSCC highlights as important independent factors in tumor development: a) age, b) gender, c) the genotype I/I of the I/D polymorphism of ACE gene and d) genotype 4G/4G of the 4G/5G polymorphism in the PAI-1 gene, while the same model for the early and late stages of OSCC includes only the first three factors. Model B (mutant heterozygotes) for the overall stages of OSCC highlights as important independent factors in tumor development: a) age, b) sex and c) the 4G/5G genotype of the -675 4G/5G polymorphism in the PAI-1 gene. The same model for the early stages of OSCC includes a) age, b) sex and also c) heterozygotes for the C677T polymorphism in the MTHFR gene. Finally, in the late stages of OSCC Model B includes the factors a) age, b) sex and also c) heterozygotes for the polymorphism C46T in the FXII gene, and d) heterozygotes for the polymorphism V34L in the FXIII gene. Model C (inheritance mode of mutations) reveals a) age, b) sex and c) the genotype I/I of the I/D polymorphism in the ACE gene as significant independent determinants of tumour growth in the mouth. The possibility of molecular detection of ACE polymorphism associated with increased risk for AKS may contribute to AKS prevention in the general population.

Εισαγωγή Η καρκινογένεση είναι μια γενετική ασθένεια στο κυτταρικό επίπεδο. Αποτελεί μια περίπτωση μη αναστρέψιμης απώλειας της γονιδιακής ρύθμισης, που ελέγχει την ανάπτυξη και την διαφοροποίηση. Η εκδήλωσή της οφείλεται σε αλλαγή του DNA και τα καρκινικά κύτταρα εμφανίζουν μια ανεξέλεγκτη μιτωτική δραστηριότητα που κάνει τα κύτταρα αυτά να είναι πιο κοντά περισσότερο με τα ανώριμα φυσιολογικά κύτταρα παρά με τους ώριμους διαφοροποιημένους κυτταρικούς τύπους, αφού παράγουν πρωτεΐνες χαρακτηριστικές εμβρυικών κυττάρων. Σε κάθε φυσιολογικό κύτταρο υπάρχει μια άριστη ποσότητα για κάθε πρωτεΐνη. Διαταραχή της γονιδιακής ρύθμισης και έκφρασης εξαιτίας μεταλλαγών ή ακόμα και πολυμορφισμών στο DNA, αλλάζει αυτή την ποσότητα και το κύτταρο παύει να είναι φυσιο- λογικό, είναι μετασχηματισμένο. Ταυτόχρονα ο καρκίνος γενικά και άρα και το ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα στόματος έχει αδιαίρετη σχέση με το σύστημα πήξεως του αίματος. Η θρομβοεμβολή άλλωστε είναι μία από τις πιο συχνές αιτίες θανάτου των ασθενών με καρκίνο. Είναι ξεκάθαρο λοιπόν πως τέτοιου είδους επιπλοκές προκύπτουν καθώς τα καρκινικά κύτταρα συνεργούν με όλους σχεδόν τους παράγοντες του αιμοστατικού συστήματος. Με δεδομένα τα παραπάνω στην παρούσα διδακτορική διατριβή μελετήθηκαν μεταλλαγές ή πολυμορφισμοί σε γονίδια των οποίων τα πρωτεϊνικά προϊόντα σχετίζονται με την πήξη του αίματος (μεθυλενοτετραϋδροφολική αναγωγάση, παράγοντας V, προθρομβίνη, παράγοντας ΧΙΙ, παράγοντας ΧΙΙΙ, πρωτεϊνη Ζ), με το σύστημα ινωδόλυσης (αναστολέας ενεργοποιητή του πλασμινογόνου, αναστολέας της ενεργοποιημένης ινωδόλυσης από την θρομβίνη) και με το σύστημα ρενίνης-αγγειοτενσίνης (ενζυμο μετατροπής της αγγειοτενσίνης, αγγειοτενσινογόνο). Υλικά και Μέθοδος Σε 163 δείγματα DNA από ασθενείς με ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα στόματος και σε 168 από υγιείς μάρτυρες, αντίστοιχης ηλικίας και φύλου, μελετήθηκαν η μεταλλαγή C677Τ στο γονίδιο της μεθυλενοτετραϋδροφολικής αναγωγάσης (MTHFR), η μεταλλαγή Leiden στο γονίδιο του παράγοντα V (FV), η μεταλλαγή G20210A στο γονίδιο της προθρομβίνη (PT), ο πολυμορφισμός C46T στο γονίδιο του παράγοντα ΧΙΙ (FXII), ο πολυμορφισμός V34L στο γονίδιο του παράγοντα XIII (FXIII), ο πολυμορφισμός -13A/G στο γονίδιο της πρωτεΐνης Ζ (PZ), ο πολυμορφισμός προσθήκης/έλλειψης 4G/5G στο γονίδιο του αναστολέας του ενεργοποιητή του πλασμινογόνου (PAI-1), ο πολυμορφισμός 1040 C/T στο γονίδιο του αναστολέα της ενεργοποιημένης ινωδόλυσης από την θρομβίνη (TAFI), ο πολυμορφισμός προσθήκης/έλλειψης στο γονίδιο του ενζύμου μετατροπής της αγγειοτενσίνης (ACE) και ο πολυμορφισμός Μ235Τ στο γονίδιο του αγγειοτενσινογόνου (AGT). Αποτελέσματα Για τον πολυμορφισμό C677T στο γονίδιο της MTHFR τα δεδομένα της μελέτης ανέδειξαν στατιστικά σημαντική αύξηση των ετεροζυγωτών για το Τ αλληλόμορφο στην ομάδα των ασθενών (P=0,043). Το αποτέλεσμα αυτό φαίνεται να οφείλεται αποκλειστικά στην υποομάδα των ασθενών με ιστορικό θρομβοφιλίας όπου επίσης οι ετεροζυγώτες για το Τ αλληλόμορφο ήταν στατιστικά σημαντικά αυξημένοι (P=0,034). Τα συνολικά δεδομένα που αποκτήθηκαν για τις μεταλλαγές Leiden στο γονίδιο του FV και G20210A στο γονίδιο της PT δεν ανέδειξαν καμία στατιστικά σημαντική διαφοροποίηση στις συγκρίσεις που έγιναν ανάμεσα στην ομάδα ελέγχου με την ομάδα των ασθενών και όλες τις υποομάδες των ασθενών. Τα συνολικά δεδομένα που αποκτήθηκαν για τον πολυμορφισμό C46T του γονιδίου FXII ανέδειξαν στατιστικά σημαντική μείωση στους ομοζυγώτες ασθενείς P=0,008. Ομοίως στατιστικά σημαντικές μειώσεις των ετεροζυγωτών παρουσιάστηκαν και στις υποομάδες των ασθενών με προχωρημένο στάδιο καρκίνου, με ιστορικό θρομβοφιλίας και χωρίς κατανάλωση καπνού, σε σχέση πάντα με την ομάδα ελέγχου. Στην ομάδα των υγιών ατόμων (Ν=135), η μεταλλαγή V34L στο γονίδιο του FXIII βρέθηκε σε 6 ομοζυγώτες (4,44%) και σε 48 ετερόζυγα άτομα (35,56%), ενώ στην ομάδα των ασθενών (N=130) οι ομοζυγώτες ήταν 12 (9,23%) και οι ετεροζυγώτες 62 (47,69%), γεγονός που αναδεικνύει επιβαρυντικό χαρακτήρα στην παρουσία του L αλληλομόρφου. Ο ίδιος επιβαρυντικός χαρακτήρας εμφανίζεται και στις υποομάδες των ασθενών με πρώιμο στάδιο καρκίνου, χωρίς ιστορικό καρκίνου, χωρίς ιστορικό θρομβοφιλίας, χωρίς κατανάλωση καπνού και χωρίς κατανάλωση αλκοόλ. Για τον πολυμορφισμό -13A/G στο γονίδιο της PZ, καμία στατιστικά σημαντική διαφορά δεν παρουσιάστηκε ανάμεσα στην ομάδα των υγιών μαρτύρων και την ομάδα των ασθενών. Η ίδια εικόνα, χωρίς δηλαδή στατιστικά σημαντικές διαφορές, εμφανίστηκε και στη στατιστική μελέτη που έλαβε χώρα ανάμεσα στους υγιείς μάρτυρες και τις διάφορες υποομάδες των ασθενών. Για τον πολυμορφισμό προσθήκης/έλλειψης 4G/5G στο γονίδιο του PAI-1 τα συνολικά δεδομένα ανέδειξαν στατιστικά σημαντική αύξηση και των ομοζυγωτών και των ετεροζυγωτών στην ομάδα των ασθενών (P=0,001 και P=0,009 αντίστοιχα) σε σχέση με την ομάδα ελέγχου. Αυτή η εμφάνιση του 4G αλληλομόρφου ως επιβαρυντικού παράγοντα επιβεβαιώνεται και από διάφορες υποομάδες των ασθενών. Συγκεκριμένα στην υποομάδα των ασθενών με πρώιμο στάδιο καρκίνου, στην υποομάδα των ασθενών χωρίς ιστορικό καρκίνου, στην υποομάδα των ασθενών χωρίς ιστορικό θρομβοφιλίας, στην υποομάδα των ασθενών με κατανάλωση καπνού και στην υποομάδα των ασθενών χωρίς κατανάλωση αλκοόλ. Για τον πολυμορφισμό 1040C/T στο γονίδιο του TAFI στην ομάδα των υγιών ατόμων (Ν=138), το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο T βρέθηκε σε 18 ομοζυγώτες (13,04%) και σε 66 ετερόζυγα άτομα (47,83%), ενώ στην ομάδα των ασθενών (N=150) οι ομοζυγώτες ήταν 8 (5,33%) και οι ετεροζυγώτες 70 (46,67%). Οι τιμές αυτές αναδεικνύουν στατιστικά σημαντική μείωση των ομοζυγωτών (P=0,018), ενώ οι τιμές του OR=0,29 (μικρότερο της μονάδας) και των 95%CI (0,11-0,74) αποδίδουν στο συγκεκριμένο αλληλόμορφο ένα προστατευτικό χαρακτήρα για την εμφάνιση ΑΚΣ. Αυτός ο προστατευτικός χαρακτήρας του Τ αλληλομόρφου αποτυπώνεται και στις συγκρίσεις που έλαβαν χώρα ανάμεσα στους υγιείς μάρτυρες και τους ομοζυγώτες των υποομάδων των ασθενών με προχωρημένο στάδιο καρκίνου, με κατανάλωση καπνού, χωρίς κατανάλωση καπνού και χωρίς κατανάλωση αλκοόλ. Για τον πολυμορφισμό προσθήκης/έλλειψης στο γονίδιο του ACE τα δεδομένα της παρούσας μελέτης τιμές αυτές ανέδειξαν στατιστικά σημαντική αύξηση των ομοζυγωτών στην ομάδα των ασθενών σε σχέση με την ομάδα ελέγχου. Αυτή η αύξηση των ομοζυγωτών αποτυπώνεται και στις συγκρίσεις που έλαβαν χώρα ανάμεσα στους υγιείς μάρτυρες και τους ομοζυγώτες των υποομάδων των ασθενών με πρώιμο στάδιο καρκίνου, με προχωρημένο στάδιο καρκίνου, χωρίς ιστορικό καρκίνου, χωρίς ιστορικό θρομβοφιλίας, με κατανάλωση καπνού και χωρίς κατανάλωση αλκοόλ. Για τον πολυμορφισμό Μ235Τ στο γονίδιο του AGT τα συνολικά δεδομένα αυτής της μελέτης έδειξαν πως η επικράτηση του «μεταλλαγμένου» αλληλομόρφου υψηλής έκφρασης Τ δεν ήταν σημαντικά διαφορετικά στη συνολική ομάδα των ασθενών ή σε οποιαδήποτε από τις υποομάδες της, εκτός από μία. Στην υποομάδα των ασθενών με ιστορικό καρκίνου όπου εκεί και οι ομοζυγώτες αλλά και οι ετεροζυγώτες είναι σημαντικά περισσότεροι σε σύγκριση με την ομάδα ελέγχου. Τα ευρήματα της πολυπαραγοντικής λογιστικής παλινδρόμησης στο μοντέλο Α (των ομοζυγωτών για το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο) αναδεικνύει ως σημαντικούς ανεξάρτητους παράγοντες ανάπτυξης των συνολικών σταδίων του ΑΚΣ: α) την ηλικία, β) το φύλο, γ) τον γονότυπο Ι/Ι του πολυμορφισμού I/D στο γονίδιο του ACE και δ) τον γονότυπο 4G/4G του πολυμορφισμού 4G/5G στο γονίδιο PAI-1, ενώ το ίδιο μοντέλο για τα αρχικά και τα προχωρημένα στάδια του ΑΚΣ περιλαμβάνει τους τρείς πρώτους παράγοντες. Το μοντέλο Β (των ετεροζυγωτών για το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο) αναδεικνύει ως σημαντικούς ανεξάρτητους παράγοντες ανάπτυξης των συνολικών σταδίων του ΑΚΣ: α) την ηλικία, β) το φύλο και γ) τον γονότυπο 4G/5G του πολυμορφισμού -675 4G/5G στο γονίδιο PAI-1. Το ίδιο μοντέλο για τα αρχικά στάδια ΑΚΣ περιλαμβάνει τους παράγοντες α) την ηλικία, β) το φύλο και επιπλέον γ) τους ετεροζυγώτες του πολυμορφισμού C677T στο γονίδιο του MTHFR. Τέλος, για τα προχωρημένα στάδια του ΑΚΣ το μοντέλο Β περιλαμβάνει τους παράγοντες α) την ηλικία, β) το φύλο και επιπλέον γ) τους ετεροζυγώτες του πολυμορφισμού (C46T) στο γονίδιο FXII και δ) τους ετεροζυγώτες του πολυμορφισμού (V34L) στο γονίδιο του FXIII. Το μοντέλο Γ (σύμφωνα με την κληρονομικότητα του μεταλλαγμένου αλληλομόρφου) αναδεικνύει ως σημαντικούς ανεξάρτητους παράγοντες ανάπτυξης των συνολικών σταδίων του ΑΚΣ: α) την ηλικία, β) το φύλο και γ) τον γονότυπο Ι/Ι του πολυμορφισμού I/D στο γονίδιο του ACE. Συμπεράσματα Από τους 10 συνολικά πολυμορφισμούς ή μεταλλαγές που μελετήθηκαν στην παρούσα μελέτη 3 δεν παρουσίαζουν καθόλου συσχέτιση με την εμφάνιση του ΑΚΣ, 2 εμφανίζουν μέτρια συσχέτιση, 2 έχουν προστατευτική δράση και 3 σχετίζονται στενά με την εμφάνιση ΑΚΣ. H μεταλλαγή Leiden στο γονίδιο του παράγοντα V (FV), η μεταλλαγή G20210A στο γονίδιο της προθρομβίνης (PT) και ο πολυμορφισμός -13A/G στο γονίδιο της πρωτεΐνης Ζ (PZ) δεν επιδρούν στη στοματική ογκογένεση. Οι πολυμορφισμοί C677T στο γονίδιο της μεθυλενοτετραϋδροφολικής αναγωγάσης (MTHFR) και M235T στο γονίδιο του αγγειοτενσινογόνου (AGT) καταδεικνύονται ως ήπιοι επιβαρυντικοί παράγοντες για την ογκογένεση στη στοματική κοιλότητα. Τα μεταλλαγμένα αλληλόμορφα των πολυμορφισμών C46T στο γονίδιο του παράγοντα XII (FXII) και 1040C/T στο γονίδιο του αναστολέα της ενεργοποιημένης ινωδόλυσης από την θρομβίνη (TAFI) παρουσιάζουν προστατευτικό χαρακτήρα σε ότι αφορά την ανάπτυξη ΑΚΣ. Ο πολυμορφισμός V34L στο γονίδιο του παράγοντα XIIΙ (FXIII), ο πολυμορφισμός 4G/5G στο γονίδιο του αναστολέα του ενεργοποιητή του πλασμινογόνου (PAI-1) και ο πολυμορφισμός προσθήκης/διαγραφής στο γονίδιο του ενζύμου μετατροπής της αγγειοτενσίνης (ACE) σχετίζονται στενά με την εμφάνιση ακανθοκυτταρικού καρκινώματος στο στόμα. Το μοντέλο Α (των ομοζυγωτών για το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο) για τα συνολικά στάδια του ΑΚΣ αναδεικνύει ως σημαντικούς ανεξάρτητους παράγοντες ανάπτυξης της νεοπλασίας: α) την ηλικία, β) το φύλο, γ) τον γονότυπο Ι/Ι του πολυμορφισμού I/D στο γονίδιο του ACE και δ) τον γονότυπο 4G/4G του πολυμορφισμού 4G/5G στο γονίδιο PAI-1, ενώ το ίδιο μοντέλο για τα αρχικά και τα προχωρημένα στάδια του ΑΚΣ περιλαμβάνει τους τρείς πρώτους παράγοντες. Το μοντέλο Β (των ετεροζυγωτών για το μεταλλαγμένο αλληλόμορφο) για τα συνολικά στάδια του ΑΚΣ αναδεικνύει ως σημαντικούς ανεξάρτητους παράγοντες ανάπτυξης της νεοπλασίας: α) την ηλικία, β) το φύλο και γ) τον γονότυπο 4G/5G του πολυμορφισμού -675 4G/5G στο γονίδιο PAI-1. Το ίδιο μοντέλο για τα αρχικά στάδια του ΑΚΣ περιλαμβάνει τους παράγοντες α) την ηλικία, β) το φύλο και επιπλέον γ) τους ετεροζυγώτες του πολυμορφισμού C677T στο γονίδιο του MTHFR. Τέλος, για τα προχωρημένα στάδια του ΑΚΣ το μοντέλο Β περιλαμβάνει τους παράγοντες α) την ηλικία, β) το φύλο και επιπλέον γ) τους ετεροζυγώτες του πολυμορφισμού (C46T) στο γονίδιο FXII και δ) τους ετεροζυγώτες του πολυμορφισμού (V34L) στο γονίδιο του FXIII. Το μοντέλο Γ (σύμφωνα με την κληρονομικότητα του μεταλλαγμένου αλληλομόρφου) αναδεικνύει ως σημαντικούς ανεξάρτητους παράγοντες ανάπτυξης της νεοπλασίας στο στόμα: α) την ηλικία, β) το φύλο και γ) τον γονότυπο Ι/Ι του πολυμορφισμού I/D στο γονίδιο του ACE. Η δυνατότητα μοριακής ανίχνευσης του πολυμορφισμού του ACE που συνδεέται με αυξημένο κίνδυνο για ΑΚΣ μπορεί να συνεισφέρει στην πρόληψη ΑΚΣ στο γενικό πληθυσμό.