Μεταβολές λειτουργικότητας του ειδικού και του μη - ειδικού συστήματος ανοσίας σε ασθενείς με νοσοκομειακή σήψη

Abstract

Background The present study aimed to investigate changes of the immune response between sepsis due to ventilator-associated pneumonia (VAP) and sepsis due to other types of infections. Methods Peripheral venous blood was sampled from 68 patients with sepsis within 24 hours of diagnosis; 36 suffered from VAP; 32 from other nosocomial infections, all well-matched for severity, age and sex. Blood monocytes were isolated and cultured with/without purified endotoxin (lipopolysaccharide (LPS)). Estimation of tumour necrosis factor alpha (TNFα) and interleukin-6 (IL-6) in cultures’ supernatants was done by an enzyme immunoassay. Flow cytometry was used to determine subpopulations of mononuclear cells and apoptosis. To mimic pathogenesis of VAP, mononuclear cells of healthy volunteers were progressively stimulated with increased inocula of pathogens; apoptosis was determined. Results In patients with VAP, the absolute number of CD3(+)/CD4(+) lymphocytes was significantly lower (p: 0.034) and apoptosis of isolated monocytes was increased (p: 0.007) compared to other infections. TNFα and IL-6 production from LPS-stimulated monocytes was lower in patients with VAP-related sepsis than with sepsis due to other infections. Apoptosis of monocytes was induced after in vitro stimulation of mononuclear cells by a mechanism mimicking VAP. Conclusions Decrease of CD4-lymphocytes and immunoparalysis of monocytes are characteristic alterations of sepsis arising in the field of VAP.

Σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η διερεύνηση των διαφορών στην ανοσιακή απόκριση ανάμεσα στη σήψη από πνευμονία που σχετίζεται με το μηχανικό αερισμό (ΠΣΜΑ) και στη σήψη εξαιτίας άλλων λοιμώξεων. Μεθοδολογία Στη μελέτη συμμετείχαν 68 ασθενείς με σήψη, 36 εξαιτίας ΠΣΜΑ και 32 εξαιτίας άλλων λοιμώξεων, που δε διέφεραν ως προς το φύλο, την ηλικία και τη σοβαρότητα της κατάστασής τους. Εντός 24 ωρών από τη διάγνωση, ελήφθη δείγμα περιφερικού φλεβικού αίματος. Ο προσδιορισμός των υποπληθυσμών των μονοπυρήνων και της απόπτωσης έγινε με κυτταρομετρία ροής. Πραγματοποιήθηκε απομόνωση των μονοκυττάρων και καλλιέργειά τους απουσία/παρουσία ενδοτοξίνης. Στα υπερκείμενα των καλλιεργειών προσδιορίστηκαν με ανοσοενζυμική μέθοδο οι συγκεντρώσεις του παράγοντα νέκρωσης των όγκων α (TNFα) και της ιντερλευκίνης-6 (IL-6). Σε μια προσπάθεια αναπαραγωγής των συνθηκών παθογένειας της ΠΣΜΑ, μονοπύρηνα κύτταρα υγιών εθελοντών διεγέρθηκαν σταδιακά με αυξανόνενα ενοφθαλμίσματα παθογόνων και προσδιορίστηκε η απόπτωσή τους. Αποτελέσματα Στους ασθενείς με ΠΣΜΑ ο αριθμός των CD3(+)/CD4(+) λεμφοκυττάρων ήταν μικρότερος (p: 0.034) και η απόπτωση των απομονωθέντων μονοκυττάρων αυξημένη (p: 0.007) συγκριτικά με τις άλλες λοιμώξεις. Η παραγωγή TNFα και IL-6 από τα διεγερθέντα με ενδοτοξίνη μονοκύτταρα ήταν σημαντικά μικρότερη στη σήψη από ΠΣΜΑ συγκριτικά με τη σήψη από άλλες λοιμώξεις. Παρατηρήθηκε επαγωγή της απόπτωσης των μονοκυττάρων μετά από in vitro διέγερσή τους με μηχανισμό παρόμοιο με το μηχανισμό παθογένειας της ΠΣΜΑ. Συμπεράσματα Η μείωση των CD4-λεμφοκυττάρων και η ανοσοπαράλυση των μονοκυττάρων αποτελούν χαρακτηριστικά της σήψης που οφείλεται σε πνευμονία που σχετίζεται με το μηχανικό αερισμό.