Η έκφραση των υποδοχέων της τάξης HER στον καρκίνο του μαστού και βιολογική συμπεριφορά των καρκινικών κυττάρων

Abstract

In this thesis we determine the differential mRNA expression pattern of HER1-4 in 67 unselected human primary breast cancers and in normal breast tissue using RT-PCR. We examine also the signal transduction pathway induced by HER receptors and the downstream signalling proteins p21(waf1) and p27(kip1) that control cell cycle. We found a positive correlation between HER3 and HER4 mRNA levels. Compared to normal breast tissue, all four receptors were overexpressed in breast tumors and the strongest overexpression was found at HER3. Compared to normal breast tissue p21Δ, the 19kDa degraded form of p21 protein, was markedly expressed in breast cancer. HER2 expression in breast carcinomas is associated with MARK signal transduction pathway. Then we evaluated these parameters in an in vitro model too, in order to ascertain an intervention in HER signal transduction. Our data reveal a complex expression pattern of HER family in breast tumors and it is this pattern rather than the expression of individual family members that should be taken into account when evaluating novel therapeutics to target these receptors. Our finding also implicate that HER signal transduction pathways can be activated by name different mechanisms that should be targeted together with HERs.

Σκοπός της παρούσας διατριβής ήταν η διαφορική έκφραση σε επίπεδο mRNA των τεσσάρων υποδοχέων HER στον καρκίνο του μαστού καθώς και σε παρακείμενο "φυσιολογικό" ιστό. Μελετήθηκε η έκφραση των υποδοχέων HER 1-4 σε 67 πρωτοπαθείς καρκίνους μαστού καθώς και σε παρακείμενο φυσιολογικό ιστό RT-PCR. Ακολούθησε μελέτη των οδών μεταγωγής σήματος που ενεργοποιούν οι HER και της έκφρασης των μετέπειτα σημάτων (πρωτεΐνες p21(waf1) και p27(kip1) με ανοσοαποτύπωση. Διαπιστώθηκε θετική συσχέτιση μεταξύ των υποδοχέων HER-3 και HER-4. Σε σύγκριση με το φυσιολογικό ιστό, όλοι οι υποδοχείς υπερεκφράζονταν στον καρκίνο του μαστού και ιδιαίτερα ο HER-3. Διαπιστώθηκε αρνητική συσχέτιση του HER4 με το βαθμό κακοήθειας (HPG). Τα αποτελέσματα της ανοσοαποτύπωσης αποκαλύπτουν πολύ υψηλότερα ποσοστά έκφρασης της πρωτεΐνης p21Δ (αποδομημένη μορφή της p21) σε σχέση με το "φυσιολογικό" μαστό. Επιπλέον οι HER-2 θετικοί όγκοι ενεργοποιούν επιλεκτικά την οδό της MARK. Στην προσπάθεια κατανόησης της παρέμβασης στις οδούς που ενεργοποιούν οι HER μελετήθηκε η επίδραση των αυξητικών παραγόντων EGF και HRG και του μονοκλωνικού αντισώματος trasturumab σε in vitro κυτταρικά πρότυπα. Τα αποτελέσματα φανερώνουν την πολυπλοκότητα της έκφρασης και της ενεργοποίησης των υποδοχέων HER στον καρκίνο του μαστού. Από τα ευρήματά μας προκύπτει επίσης ότι οι οδοί μεταγωγής σήματος μέσω των HER μπορεί να ενεργοποιούνται με διαφορετικούς μηχανισμούς οι οποίοι παράλληλα, θα πρέπει να στοχεύονται ταυτόχρονα με τους HER.