ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΚΑΙ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΣ ΑΝΤΙΓΟΝΩΝ ΤΗΣ ΣΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΗΣ ΚΑΙ ΠΝΕΥΜΟΝΙΚΗΣ ΒΑΣΙΚΗΣΜΕΜΒΡΑΝΗΣ

Abstract

ANTIBODIES TO GLOMERULAR BASEMENT MEMBRANE (GBM) HAVE BEEN SHOWN TO BE OF PATHOGENIC SIGNIFICANCE IN GOODPASTURE'S SYNDROME AND IN ONE FORM OF RAPIDLY PROGRESSIVE GLOMERULONEPHRITIS. TO ELUCIDATE THE NATURE OF THE SPECIFIC AND CHEMICAL CHARACTERISATION OF HUMAN GBM AND ALVEOLAR BASEMENT MEMBRANE (ABM) WAS PERFORMEDFOLLOWING PURIFICATION ON GEL FILTRATION AND DEAE-CELLULOSE AND ABSORPTION ON CNBR SEPHAROSE 4B. THE ANTIGENIC FRACTIONS WERE IDENTIFIED USING THE ANTI-GBM AND ANTI-ABM SOLID PHASE IMMUNOASSAY AND ELISA WHICH WAS DEVELOPED FOR THIS STUDY. THE PROTEIN AND AMINO ACID CONTENT WAS MEASURED AND THE MOLECULAR WEIGHT WASESTIMATED USING SDS-PAGE ELECTROPHORESIS. THE IMMUNOCHEMICAL STUDIES SHOWED ATLEAST THREE SPECIFIC ANTIGENS SHARED BY BOTH GBM AND ABM AND POSSIBLY TWO NOT SHARED BY ABM. THIS WAS CONFIRMED USING ABSORPTION EXPERIMENTS. DETERMINATION AND QUANTIFICATION OF GBM AND ABM ANTIGENIC FRAGMENTS IN THE URINE OF PATIENTS WITH RENAL DISEASE WAS ALSO ACHIEVED. THE ABOVE STUDY WILL CONTRIBUTE IN THE COORDINATION OF IMMUNE MECHANISMS TOWARDS A SELECTIVE IMMUNOTHERAPY, IN A WAY OF MEASURING GLOMERULAR INFLAMMATION AND A FOLLOW-UP OF THE THERAPY OF PATIENTS WITH ANTI-INFLAMMATORY DRUGS.

ΕΧΕΙ ΑΠΟΔΕΙΧΘΕΙ ΟΤΙ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ ΕΝΑΝΤΙΟΝ ΑΝΤΙΓΟΝΩΝ ΤΗΣ ΣΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΗΣ ΒΑΣΙΚΗΣ ΜΕΜΒΡΑΝΗΣ (ΣΒΜ) ΕΙΝΑΙ ΠΑΘΟΛΟΓΙΚΗΣ ΣΗΜΑΣΙΑΣ ΣΤΟ ΣΥΝΔΡΟΜΟ GOODPASTURE'S ΚΑΙ ΤΗΝ ΤΑΧΕΩΣ ΕΞΕΛΙΣΣΟΜΕΝΗ ΣΠΕΙΡΑΜΑΤΟΝΕΦΡΙΤΙΔΑ. ΓΙΑ ΝΑ ΑΝΙΧΝΕΥΘΕΙ Η ΦΥΣΗ ΤΩΝ ΕΙΔΙΚΩΝ ΑΝΤΙΓΟΝΩΝ ΠΟΥ ΣΧΕΤΙΖΟΝΤΑΙ ΜΕ ΤΟ ΣΥΝΔΡΟΜΟ GOODPASTURΕ'S, ΜΕΛΕΤΕΣ ΑΠΟΜΟΝΩΣΗΣ ΚΑΙ ΧΗΜΙΚΟΥ ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΜΟΥ ΔΙΕΞΗΧΘΗΣΑΝ ΣΕ ΑΝΘΡΩΠΙΝΗ Σ.Β .Μ ΚΑΙ ΠΝΕΥΜΟΝΕΣ. Η ΑΠΟΜΟΝΩΣΗ ΤΗΣΣΒΜ ΚΑΙ ΤΗΣ ΠΝΕΥΜΟΝΙΚΗΣ ΒΑΣΙΚΗΣ ΜΕΜΒΡΑΝΗΣ (ΠΒΜ) ΑΚΟΛΟΥΘΗΘΗΚΕ ΑΠΟ ΔΙΗΘΗΣΗ ΣΕ ΓΕΛΗ, ΚΑΘΟΡΙΣΜΟ ΜΕ DEAE- ΚΥΤΤΑΡΙΝΗ ΚΑΙ ΑΝΟΣΟΑΠΟΡΡΟΦΗΣΗ ΜΕ ΕΝΕΡΓΟΠΟΙΗΜΕΝΟ CNBR- SEPHAROSE 4B . ΤΑ ΑΝΤΙΓΟΝΙΚΑ ΚΛΑΣΜΑΤΑ ΕΝΤΟΠΙΣΘΗΚΑΝ ΜΕ ΤΗΝ ΑΝΟΣΟΜΕΘΟΔΟ ΑΝΤΙ- ΣΠΕΙΡΑΜΑΤΙΚΗΣ ΒΑΣΙΚΗΣ ΜΕΜΒΡΑΝΗΣ ΚΑΙ ΑΝΤΙ-ΠΒΜ ΚΑΙ ΤΗΝ ΑΝΟΣΟΕΝΖΥΜΙΚΗ ΜΕΘΟΔΟ ELISA. ΤΑ ΚΛΑΣΜΑΤΑ ΤΥΠΟΠΟΙΗΘΗΚΑΝ ΓΙΑ ΠΕΡΙΕΚΤΙΚΟΤΗΤΑ ΣΕ ΠΡΩΤΕΙΝΗ ΚΑΙ ΑΜΙΝΟΞΕΑ. ΤΟ ΜΟΡΙΑΚΟ ΒΑΡΟΣ ΤΩΝ ΚΛΑΣΜΑΤΩΝ ΥΠΟΛΟΓΙΣΘΗΚΕ ΜΕ ΗΛΕΚΤΡΟΦΟΡΗΣΗ SDS-PAGE. ΟΙ ΑΝΟΣΟΧΗΜΙΚΕΣ ΜΕΛΕΤΕΣ ΕΔΕΙΞΑΝ ΤΟΥΛΑΧΙΣΤΟΝ ΤΡΙΑ ΕΙΔΙΚΑ ΑΝΤΙΓΟΝΑ ΚΟΙΝΑ ΓΙΑ ΤΗΝ ΣΒΜ ΚΑΙ ΠΒΜ ΚΑΙ ΔΥΟΑΛΛΑ ΑΝΤΙΓΟΝΑ ΓΙΑ ΤΟΝ ΣΒΜ ΜΟΝΟ. ΠΕΙΡΑΜΑΤΑ ΠΡΟΣΡΟΦΗΣΗΣ ΕΠΑΛΗΘΕΥΣΑΝ ΤΗΝ ΥΠΑΡΞΗ ΠΕΡΙΣΣΟΤΕΡΟΥ ΑΠΟ ΕΝΑ ΣΥΣΤΗΜΑ ΑΝΤΙΓΟΝΟΥ-ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ. ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΚΑΙ ΠΟΣΟΤΙΚΟΣ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΣΒΜ ΚΑΙ ΠΒΜ ΑΝΤΙΓΟΝΙΚΩΝ ΚΛΑΣΜΑΤΩΝ ΕΓΙΝΕ ΣΤΑ ΟΥΡΑ ΑΣΘΕΝΩΝ ΜΕ ΝΕΦΡΟΠΑΘΕΙΕΣ ΜΕ ΤΗΝ ΜΕΛΛΟΝΤΙΚΗ ΕΦΑΡΜΟΓΗ ΕΞΕΙΔΙΚΕΥΜΕΝΗΣ ΑΝΟΣΟΘΕΡΑΠΕΙΑΣ ΚΑΙ ΜΕΤΡΗΣΗ ΤΗΣ ΦΛΕΓΜΟΝΗΣ.