Γενετική μελέτη σε γονίδια που σχετίζονται με αγγειακά εγκεφαλικά επεισόδια

Abstract

Background and Purpose: There is accumulating evidence that genetic elements contribute to the pathogenesis of primary intracerebral hemorrhage (PICH). Alpha-1 antichymotrypsin (ACT), angiotensin converting enzyme (ACE) and interleukins (IL) 1a, 1b and 1Ra are implicated in vascular pathology and coagulation processes. TT genotype of the ACT A/T signal peptide polymorphism and DD genotype of ACE I/D polymorphism have been reported to confer susceptibility for PICH. We conducted a prospective study to test possible association between ACT A/T signal peptide, ACE I/D, IL-1a (-899), IL-1b (-511) and IL-1Ra (VNTR) polymorphisms and PICH in a Greek cohort. Methods: 178 patients with PICH were prospectively recruited in the study. ACT A/T signal peptide, ACE I/D, IL-1a (-899), IL-1b (-511) and IL-1Ra (VNTR) genotypes were determined in patients and 206 healthy, age and sex matched control subjects collected from Neurology outpatient Clinic using polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism method. Initial neurological status of patients was assessed by means of the Glasgow Coma Score, while we defined patients’ six-month outcome using the modified Rankin Scale. Epidemiological risk factors as well as location and volume of the hemorrhage were also recorded. Possible associations were examined using the t-test, the Fisher’s exact test and the χ2 test. Odds ratios with the corresponding 95% confidence intervals were calculated using logistic regression analysis. Results: No statistically significant difference was found in allele and genotype frequencies of all polymorphisms between patients and normal controls. (ACT polymorphism [OR(95% C.I.)]=1.14(0.64-2.01), ACE=1.08(0.58-1.82), IL-1α(-899)=1.03 (0.55-2.02), IL-1β(-511)=0.66(0.51-1.53), IL-1ra (VNTR)=1.27(0.62-2.54). However, our study showed an association [OR (95%C.I.)=2.57 (1.02-6.51), p=0.05] between ACT TT genotype and normotensive PICH patients. Conclusions: Our data confirm the previously reported association between ACT A/T signal peptide polymorphism and normotensive PICH patients. In the non-hypertensive patients, although they represent a heterogenic group, it is possible, that the absence of hypertension unmask the relatively minor effects of ACT A/T signal peptide polymorphism on cerebral vasculature making it more susceptible to hemorrhage. However, further studies should be conducted to confirm and evaluate this association.

Εισαγωγή και σκοπός: Στην παθογένεση της πρωτοπαθούς ενδοεγκεφαλικής αιμορραγίας (ΠΕΑ) εμπλέκονται τόσο γενετικοί όσο και επιδημιολογικοί παράγοντες κινδύνου. Η Α1-αντιχυμοθρυψίνη (ACT), το μετατρεπτικό ένζυμο της αγγειοτενσίνης (ACE) και οι ιντερλευκίνες (IL) 1α, 1β και 1Ra έχει βρεθεί ότι εμπλέκονται στην παθολογία του αγγειακού τοιχώματος και τους μηχανισμούς πήξης. Μελέτες έχουν δείξει ότι ο ΤΤ γονότυπος του Α/Τ πολυμορφισμού του πεπτιδίου συνθήματος της ACT και ο DD γονότυπος του I/D πολυμορφισμού του ACE αυξάνουν τον κίνδυνο εμφάνισης ΠΕΑ. Σκοπός της παρούσας προοπτικής μελέτης είναι η διερεύνηση πιθανής συσχέτισης μεταξύ των ACT A/T, ACE I/D, IL-1α (-899), IL-1β (-511) και IL-1Ra (VNTR) γενετικών πολυμορφισμών και Ελλήνων ασθενών με ΠΕΑ. Μέθοδος: Η μελέτη διενεργήθηκε σε 178 ασθενείς με ΠΕΑ και 206 φυσιολογικούς μάρτυρες σε αντιστοιχία με τους ασθενείς ως προς την ηλικία και το φύλο. Κατά την καταγραφή των ασθενών μεταξύ των στοιχείων που συλλέχθηκαν αξιολογήθηκαν τα εξής: ηλικία, φύλο, επιδημιολογικοί παράγοντες κινδύνου, εντόπιση και όγκος της αιμορραγίας, κλίμακα κώματος Γλασκώβης κατά την είσοδο του ασθενούς και 6μηνη έκβαση σύμφωνα με την τροποποιημένη κλίμακα του Rankin. Η ταυτοποίηση των γονοτύπων της ACT (-15 A/T), του ACE I/D, της IL-1α (-899), της IL-1β(-511C/T) και της IL-1ra (VNTR) έγιναν με γνωστές PCR/RFLP μεθόδους. Πιθανές συσχετίσεις εξετάσθηκαν με τη χρήση του Fisher’s exact test, του t-test και του χ2 test και οι αναλογίες πιθανοτήτων με τα αντίστοιχα 95% διαστήματα εμπιστοσύνης υπολογίστηκαν με βάση την ανάλυση με λογιστική παλινδρόμηση. Αποτελέσματα: Από τη μελέτη δεν προέκυψε κάποια στατιστικώς σημαντική διαφορά στις συχνότητες των γονοτύπων και των αλληλομόρφων μεταξύ των ασθενών και των φυσιολογικών μαρτύρων στους εξετασθέντες πολυμορφισμούς (για τον πολυμορφισμό της ACT [OR(95% C.I.)]=1.14(0.64-2.01), ACE=1.08(0.58-1.82), IL-1α(-899)=1.03(0.55-2.02), IL-1β(-511)=0.66(0.51-1.53), IL-1ra (VNTR)=1.27(0.62-2.54). Στη μελέτη μας όμως διαπιστώθηκε ότι ο γονότυπος ΤΤ της ACT σχετίζεται με αυξημένο κίνδυνο πρόκλησης ΠΕΑ στους μη υπερτασικούς ασθενείς OR (95% C.I.)=2.57 (1.02-6.51) p=0.05. Συμπεράσματα: Η μελέτη μας επιβεβαιώνει τα θετικά αποτελέσματα που έχουν αναφερθεί στους μη υπερτασικούς ασθενείς με ΠΕΑ. Η απουσία υπέρτασης, που αποτελεί τον κύριο παράγοντα κιν­δύ­νου για την εκδήλωση της ΠΕΑ, πιθανόν να καθιστά φανερή την επίδραση του ACT πολυμορφισμού στο αγγειακό δίκτυο του εγκεφάλου αυξάνοντας την ευαισθησία για αιμορραγία. Ωστόσο, απαιτείται περαιτέρω έρευνα για την επιβεβαίωση των παραπάνω συσχετίσεων και την εξακρίβωση των υποκείμενων παθογενετικών μηχανισμών