Εφαρμογές τεχνικών ιστοκαλλιέργειας στην αγριοκερασιά Prunus avium L.

Abstract

In the present Ph.D thesis , a protocol on the propagation of willd cherry Prunus avium L was recommended using the tissue culture techniques aiming at the creation of genotypes that produces timber of high quality and other forestry’s and agricultural uses. Shoots of 2,5 cm with one bud and knee taken from root suckers of selected greek clones ( Bathitopos Nevrokopis rgion ) stratified in the greenhouses , were used as explants . Also buds tip from the same clones were used as explants . 93 % of the shoot explants remained without contamination when disinfected with 10 % V/V sodium hypochlorite first then with 0,1% W/V HgCl2 for 3 minute . 98 % of buds remained free of contamination when disinfected with solution contained 0,5 g ·l-1 fungicide Benlate for 15 minute and then with with 0,5 g ·l-1 Streptomycin for 30 minute then with ethylic alcohol for 5 minute . In the stage of proliferation , effect of various cytokinins concentrations was studied the better result observed when shoots explants cultivated on MS modified medium ( ½ NH4NO3 ) with 4,4 μΜ ΒΑ , 0,04 μΜ ΙΒΑ , 0,02 μΜ GA3 , were 4 shoots per explant produced withen 4 weeks . 0,3 shoots observed fro the buds in 8 weeks that leads to the conclusen that the juvenile shoots is more advanteges from the mature ( buds ) when propagated . In the sam stage the efect of the clone and the light was researched and show that the clone has objective efect and the light has no important effect . Also the effect of the light on the elongation of micropropagated shoots was studied , so the red light show most positive effect than other . In the rooting stage the effect of various concentrations of Auxins IBA was studied , it was show that percentage 80-100 % of shoots ( depending on clone ) rooted on the modified medium ( 1/5 macro element ) contained 17,15 μΜ IBA , 0,1 μΜ GA3 , 20 g sucrose , within 4 weeks . the experiment show the important effect of clone in the various stages of the proliferation , what different clone give different number and length of shoots and roots . the observed plants pass the stag of the acclimatization and transplantation with absolute success

Στην παρούσα Δ. διατριβή συστήθηκε ένα πρωτόκολλο για το πολλαπλασιασμό της αγριοκερασιάς με χρήση των τεχνικών της ιστοκαλλιέργειας με στόχο την δημιουργία γενοτύπων που παράγουν ξύλο υψηλής ποιότητας και για άλλες δασολογικές και γεωπονικές χρήσεις. Το υλικό που χρησιμοποιήθηκε ήταν τμήματα βλαστών 2,5 cm με ένα γόνατο και ένα οφθαλμό , που πάρθηκαν από ριζοβλαστήματα επιλεγμένων ελληνικής κλώνων αγριοκερασιάς ( περιοχή Βαθύτοπος Νευροκοπίου ) που είχαν στρωματωθεί στο θερμοκήπιο .Επίσης χρησιμοποιήθηκαν οφθαλμοί βλαστοφόροι επάκρια η ο κεντρικός οφθαλμός από τις ροζέτες , από τους ίδιους κλώνους . Το 93 % των εκφύτων από τα ριζοβλαστήματα έμειναν χωρίς μόλυνση όταν απολυμάνθηκαν με 10 % V/V υποχλωριώδεςς νατρίου και με 0,1% W/V HgCl2 για 3 λεπτά . Επίσης Το 98 % από τους οφθαλμούς έμειναν χωρίς μόλυνση όταν απολυμάνθηκαν με διάλυμα 0,5 g ·l-1 του μυκητοκτόνου Benlate για 15 λεπτά , και με 0,5 g ·l-1 στρεπτομυκίνης για 30 λεπτά και με καθαρής αιθυλικής Αλκοόλης για 10 λεπτά . Στο στάδιο του πολλαπλασιασμού μελετήθηκε η επίδραση διαφόρων συγκεντρώσεων κυτοκινίνης . Η καλύτερη περίπτωση ήταν τα εκφυτα από ριζοβλαστήματα καλλιεργούμενα σε θρεπτικό υπόστρωμα τροποποιημένο MS ( ½ NH4NO3 ) που περιείχε 4,4 μΜ ·l-1 κυτοκινίνης ΒΑ , 0,04 μΜ·l-1 αυξίνης ΙΒΑ , 0,02 μΜ ·l-1 γιββεριλλίνης GA3 , στο υπόστρωμα παρήχθησαν τέσσερις βλαστοί ανα έκφυτο σε διάστημα τεσσάρων εβδομάδων . Οι οφθαλμοί έδωσαν 0,3 βλαστούς ανά οφθαλμό έτσι το αποτέλεσμα ήταν ασύμφορο σε σύγκριση με την περίπτωση των βλαστών από ριζοβλαστήματα και με πολύ πιο αργό ρυθμό πράγμα που οδηγεί στο συμπέρασμα ότι οι νεανικοί βλαστοί ( ριζοβλαστήματα ) συμπεριφέρονται καλύτερα από τους ώριμους ιστούς ( οφθαλμοί ) . Στο σταδιο μελετήθηκε επίσης η επίδραση του κλώνου και η ποιότητα του φωτός στο σχυματισμό ωέων μασχαλαίων βλαστών και βρέθηκε ότι η μεν πρώτη ήταν θετική και η δε δέυτερη δεν είχε σημαντική είδραση . Επίσης μελετήθηκε η επίδραση της ποιότητας του φωτός στην επιμήκυνση των βλαστών και φάνηκ την πιο θετική επίδραση του ερυθρού φωτός στην επιμήκυνση βλαστών από ριζοβλαστήματα. Στο στάδιο ριζοβολίας των βλαστών της αγριοκερασιάς μελετήθηκε η επίδραση διαφόρων συγκεντρώσεων αυξίνης ΙΒΑ σε βλαστούς από ριζοβλαστήματα . Βρέθηκε ότι ποσοστό 80 - 100 % ( σύμφωνα με το κλώνο ) από τους παραπάνω βλαστούς ριζοβόλησαν σε τροποποιημένο θρεπτικό υπόστρωμα MS ( 1/5 των μακροστοιχείων ) εμπλουτισμένο με 17,15 μΜ ·l-1 ΙΒΑ , 0,1 μΜ ·l-1 GA3 , 20 g ·l-1 σακχαρόζη , σε περίοδο τεσσάρων εβδομάδων . Επίσης από τα πειράματα φάνηκε καθαρά η σημαντική επίδραση του κλώνου στα διάφορα στάδια του πολλαπλασιασμού των βλαστών της αγριοκερασιάς ,ώστε διαφορετικοί κλώνοι δίνουν διαφορετικό αριθμός και μήκος των βλαστών και ριζών. Οι ριζοβολημένοι βλαστοί από ριζοβλαστήματα εγκλιματίστηκαν και μεταφυτεύτηκαν κανονικά στο έδαφος με απόλυτη επιτυχία