Μελέτη μοριακών διαταραχών ετερζυγωτών β μεσογειακής αναιμίας με αυξημένα επίπεδα αιμοσφαιρίνης F και συσχέτιση τους με αιματολογικές κα...

Abstract

ΤΟ 7% ΤΩΝ ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΩΝ Β ΜΑ ΕΜΦΑΝΙΖΕΙ HBF>2.5%.ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΠΑΡΟΥΣΑΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ ΕΙΝΑΙ Η ΣΥΣΧΕΤΙΣΗ ΤΩΝ ΕΠΙΠΕΔΩΝ HBF 73 ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΩΝ Β ΜΑ ΜΕ HBF ΑΠΟ 2.6-14%ΜΕ : Α)ΤΟΝ ΓΟΝΟΤΥΠΟ ΣΤΑ Α ΚΑΙ Β ΓΟΝΙΔΙΑ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ, Β)ΤΟΝ ΑΠΛΟΤΥΠΟ ΣΤΟ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑ ΤΩΝ Β ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ,Γ)ΤΟΥΣ ΠΟΛΥΜΟΡΦΙΣΜΟΥΣ,'Η ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΣΤΟΥΣ ΥΠΟΚΙΝΗΤΕΣ ΤΩΝ Γ ΓΟΝΙΔΙΩΝ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ,Δ)ΤΟ ΦΥΛΟ.ΟΛΑ ΤΑ ΠΕΡΙΣΤΑΤΙΚΑ ΕΦΕΡΑΝ ΓΝΩΣΤΕΣ ΣΗΜΕΙΑΚΕΣ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΣΤΟ Β ΓΟΝΙΔΙΟ.ΓΟΝΙΔΙΑΚΗ ΧΑΡΤΟΓΡΑΦΗΣΗ ΑΠΕΚΛΕΙΣΕ ΤΗΝ ΥΠΑΡΞΗ ΕΛΛΕΙΜΜΑΤΩΝ ΣΤΟ ΣΥΜΠΛΕΓΜΑ ΤΩΝ Β ΓΟΝΙΔΙΩΝ,ΕΝΩ ΜΟΝΟ ΔΥΟ ΕΦΕΡΑΝ ΤΡΙΠΛΑΣΙΑΣΜΕΝΟ Γ ΓΟΝΙΔΙΟ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ(ΓΓΓ/ΓΓ).ΤΡΙΠΛΑΣΙΑΣΜΕΝΟ Α ΓΟΝΙΔΙΟ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ ΑΑΑ/ΑΑ ΒΡΕΘΗΚΕ ΣΕ 17/73 ΠΕΡΙΣΤΑΤΙΚΑ (23.3%) (2.2% ΣΤΟ ΓΕΝΙΚΟ ΠΛΗΘΥΣΜΟ).ΟΙ ΔΙΠΛΟΙ ΑΥΤΟΙ ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΕΣ ΔΙΑΚΡΙΝΟΝΤΑΙ ΑΠΟ ΧΑΜΗΛΟΤΕΡΟΥΣ ΕΡΥΘΡΟΚΥΤΤΑΡΙΚΟΥΣ ΔΕΙΚΤΕΣ,ΥΨΗΛΟΤΕΡΟ ΑΡΙΘΜΟ ΔΙΚΤΥΟΕΡΥΘΡΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΚΑΙ ΒΙΟΣΥΝΘΕΤΙΚΟ ΛΟΓΟ Α/NONA ΣΕ ΣΥΓΚΡΙΣΗ ΜΕ ΤΟΥΣ ΥΠΟΛΟΙΠΟΥΣ 56/73 ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΕΣ Β ΜΑ (76%),ΕΝΩ ΕΜΦΑΝΙΖΟΥΝ ΑΡΝΗΤΙΚΗ ΓΡΑΜΜΙΚΗ ΣΥΣΧΕΤΙΣΗ ΜΕΤΑΞΥ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ ΚΑΙ HBF (R-0.67,P<0,01).ΤΟ 70.3% ΤΩΝ ΠΕΡΙΣΤΑΤΙΚΩΝ ΕΦΕΡΑΝ ΒΟ ΜΕΤΑΛΛΑΞΗ.ΤΑ ΑΙΜΑΤΟΛΟΓΙΚΑ ΕΥΡΗΜΑΤΑ ΤΩΝ 56 ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΩΝ Β ΜΑ ΕΙΝΑΙ ΣΥΓΚΡΙΣΙΜΑ ΤΩΝ ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΩΝ ΜΕ HBF <2%ΕΚΤΟΣ ΑΠΟ ΤΟ RDW(P<0.0005).ΒΡΕΘΗΚΑΝ 11 ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΣΕ ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΗ ΣΥΧΝΟΤΗΤΑ ΑΠΟ ΑΥΤΗ ΤΩΝ ΕΤΕΡΟΖΥΓΩΤΩΝ Β ΜΑ ΜΕ HBF<2%.Η ΠΛΕΙΟΨΗΦΙΑ (81.5%) ΗΤΑΝ ΒΟ ΜΕ ΣΥΧΝΟΤΕΡΕΣ ΤΙΣ CD39 C->T (34.7%) ΚΑΙ IVSII-1 G->A (24.5%).ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΗΚΑΝ 7 ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΟΙ ΑΠΛΟΤΥΠΟΙ(ΑΥΤΟΙ ΠΟΥ ΑΝΑΜΕΝΟΝΤΑΝ ΓΙΑ ΚΑΘΕ ΜΕΤΑΛΛΑΞΗ).ΔΥΟ ΠΟΛΥΜΟΡΦΙΣΜΟΙ ΒΡΕΘΗΚΑΝ ΣΤΟΥΣ ΥΠΟΚΙΝΗΤΕΣ ΤΩΝ Γ ΓΟΝΙΔΙΩΝ:Ο (C>T)- 158 ΣΤΟ GΓ(ΧMNL) ΓΟΝΙΔΙΟ ΚΑΙ Ο (A>G)-588 ΣΤΟ ΑΓ ΓΟΝΙΔΙΟ(ΣΕ ΣΥΝΔΕΣΗ ΜΕΤΑΞΥ ΤΟΥΣ).Ο ΛΟΓΟΣ GΓ/ΑΓ ΤΩΝ ΑΛΥΣΙΔΩΝ ΑΙΜΟΣΦΑΙΡΙΝΗΣ ΗΤΑΝ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΑ

HEMOGLOBIN F LEVELS IN B-THALASSEMIA (THAL) HETEROZYGOTES ARE USUALLY<2%.AMONGST MORE THAN 1000 B-THAL HETEROZYGOTES STUDIED 7% HAD HBF>2.5%. TO INVESTIGATE FACTORS THAT MAY INFLUENCE HBF IN 73 B-THAL HETEROZYGOTES WITH HBF LEVELS BETWEEN 2.6-14% WE ASSESSED:I)A-AND B-GLOBIN GENOTYPES,II)B-GLOBIN GENE CLUSTER HAPLOTYPES,III)SEQUENCES OF THE GΓ AND AΓ-GLOBIN GENE PROMOTERS AND IV)GENDER.ALL SAMPLES WERE FOUND TO CARRY KNOWN B-THAL POINT MUTATIONS;GENE MAPPING EXCLUDED B GENE CLUSTER DELECTIONS , AND FOUND ONLY 2 CASES WITH IN ADDITIONAL Γ GLOBIN GENE(ΓΓΓ/ΓΓ).TRIPLICATED A-GLOBIN GENE ARRANGEMENT (ΑΑΑ/ΑΑ) WAS FOYND IN 17/73 CASES (23.3%)(GENERAL POPULATION 2.2%).THESE CASES WERE DISTINGUISHED FROM THE SIMPLE B-THAL HETEROZYGOTES(56/73,76%) BY LOWER RED CELL INDICES AND HIGHER A/NON A BIOSYNTHETIC RATIOS AND DEMOΝSTRATED NEGATIVE LINEAR CORRELATION BETWEEN HEMOGLOBIN LEVELS AND HBF(R-0.67, P<0.01).MOST (70.3%) CARRIED BO MUTATIONS:ONLY TWO HAD A MILD B++ MUTATION. IN 56/73 SIMPLE B-THAL HETEROZYGOTES HEMATOLOGICAL INDICES WERE COMPARABLE TO THOSE OF B-THAL HETEROZYGOTES WITH HBF<2%.WΙTH THE EXCEPTION OF HIGHER RDW(P<0.0005).THE ELEVEN B-THAL MUTATIONS OBSERVED,HAD VERY DIFFERENT FREQUENCIES TO THOSE FOUND IN B-THAL HETEROZYGOTES WITH HBF<2% BO MUTATIONS ACCOUNTED FOR 81.5%(CD39 C->T34.7% .INVSII-1 G->A 24.5%).SEVEN B GENE CLUSTER HAPLOTYPES WERE CHARACTERIZED,EACH ASSOCIATED TO THE EXPECTED B-THAL MUTATION.TWO POLYMORPHISMS(IN LINKAGE DISEQUILIBRIUM)WERE IDENTIFIED IN Γ-GLOBIN GENE PROMOTERS:C->T AT POSITION -158(XMNL) IN THE GΓ-GLOBIN GENE AND A->G -588 TO THE AΓ-GENE.:GΓ/ΑΓ RATIOS WERE H