Η εκτίμηση του κλάσματος πολλαπλασιασμού των κυττάρων με τεχνικές αυτοματοποιημένης κυτταρολογίας στον έλεγχο των νεοπλασμάτων του ουρο...

Abstract

ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΕΡΓΑΣΙΑΣ ΑΥΤΗΣ ΗΤΑΝ ΝΑ ΜΕΛΕΤΗΘΕΙ Η ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥ ΠΥΡΗΝΙΚΟΥ ΑΝΤΙΓΟΝΟΥ ΠΟΛΛΑΠΛΑΣΙΑΖΟΜΕΝΩΝ ΚΥΤΤΑΡΩΝ (PCNA), ΣΤΟΝ ΚΑΡΚΙΝΟ ΤΗΣ ΚΥΣΤΕΩΣ ΑΠΟ ΜΑΤΑΒΑΤΙΚΟ ΕΠΙΘΗΛΙΟ, ΚΑΙ ΝΑ ΣΥΣΧΕΤΙΣΘΕΙ ΜΕ ΤΟ ΒΑΘΜΟ ΔΙΑΦΟΡΟΠΟΙΗΣΗΣ(GRADE), ΤΟ ΣΤΑΔΙΟ ΚΑΙ ΤΗΝ ΠΛΟΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΤΟΥ DNA ΤΟΥ ΟΓΚΟΥ.Ο ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΤΟΥ PCNA ΕΓΙΝΕ ΣΕ ΤΟΜΕΣ ΠΑΡΑΦΙΝΗΣ, ΑΠΟ 60 ΑΡΡΩΣΤΟΥΣ, ΜΕ ΤΗ ΧΡΗΣΗ ΤΟΥ ΜΟΝΟΚΛΩΝΙΚΟΥ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΟΣ PC-10 ΚΑΙ ΤΗΝ ΕΦΑΡΜΟΓΗ ΤΗΣ ΑΝΟΣΟΙΣΤΟΧΗΜΙΚΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ ΑΒΙΔΙΝΗΣ-ΕΞΤΡΑΒΙΔΙΝΗΣ.Ο ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΟΥ ΔΕΙΚΤΗ DNA ΕΓΙΝΕ ΣΕ ΕΝΤΥΠΩΜΑΤΑ, ΑΠΟ ΤΕΜΑΧΙΑ ΙΣΤΩΝ ΤΩΝ ΙΔΙΩΝ ΑΥΤΩΝ ΑΦΑΙΡΕΘΕΝΤΩΝ ΟΓΚΩΝ, ΜΕΤΑ ΑΠΟ ΧΡΩΣΗ ΜΕ ΤΗ ΜΕΘΟΔΟ FEULGEN.ΟΙ ΠΑΡΑΠΑΝΩ ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΙ ΕΓΙΝΑΝ ΣΕ ΑΝΑΛΥΤΗ ΕΙΚΟΝΑΣ CAS 100. ΑΠΟ ΤΗΝ ΑΝΑΛΥΣΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΒΡΕΘΗΚΕ ΝΑ ΥΠΑΡΧΕΙ ΣΤΑΤΙΣΤΙΚΑ ΣΗΜΑΝΤΙΚΗ ΔΙΑΦΟΡΑ ΤΗΣ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΤΟΥ PCNA ΤΟΣΟ ΜΕΤΑΞΥ ΤΩΝ ΔΙΑΦΟΡΩΝ GRADES, ΟΣΟ ΚΑΙ ΜΕΤΑΞΥ ΤΩΝ ΣΤΑΔΙΩΝ ΚΑΙ ΜΕΤΑΞΥ ΤΩΝ ΔΙΠΛΟΕΙΔΙΚΩΝ ΚΑΙ ΑΝΕΥΠΛΟΕΙΔΙΚΩΝ ΟΓΚΩΝ (P=<0,01).ΒΡΕΘΗΚΕ ΑΚΟΜΑ ΟΤΙ ΥΠΑΡΧΕΙ ΘΕΤΙΚΗ ΣΥΣΧΕΤΙΣΗ ΜΕΤΑΞΥ ΤΗΣ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΤΟΥ PCNA ΚΑΙ ΤΟΥ ΔΕΙΚΤΗ DNA, Η ΟΠΟΙΑ ΕΙΝΑΙ ΠΟΛΥ ΣΗΜΑΝΤΙΚΗ ΣΤΙΣ ΠΕΡΙΠΤΩΣΕΙΣ ΤΟΥ GRADE II ΚΑΙ GRADE II/ΣΤΑΔΙΟ TA ΚΑΙ ΣΗΜΑΝΤΙΚΗ ΣΤΑ GRADE III, GRADE II/ΣΤΑΔΙΟ Τ1 ΚΑΙ GRADEIII/ΣΤΑΔΙΟ Τ2(Ν=31, R=0,73, N=23, R=0,66 ,N=18,R=0,55, N=8,R=0,64 KAI N=10, R=0,65).ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΙΚΑ ,Ο ΠΡΟΣΔΙΟΡΙΣΜΟΣ ΤΗΣ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΤΟΥ PCNA ΜΠΟΡΕΙ ΝΑ ΓΙΝΕΙ ΣΕ ΤΟΜΕΣ ΠΑΡΑΦΙΝΗΣ ΚΑΙ ΝΑ ΜΕΤΡΗΘΕΙ ΜΕ ΤΗΝ ΑΝΑΛΥΣΗ ΕΙΚΟΝΑΣ.ΑΠΟ ΤΗΝ ΑΝΑΛΥΣΗ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ ΦΑΙΝΕΤΑΙ ΟΤΙ ΥΠΑΡΧΕΙ ΣΧΕΣΗ ΤΗΣ ΕΚΦΡΑΣΗΣ ΤΟΥ PCNA ΜΕ ΤΟ GRADE, ΤΟ ΣΤΑΔΙΟ ΚΑΙ ΤΗΝ ΠΛΟΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑ ΤΩΝ ΟΓΚΩΝ.ΣΥΓΚΡΙΤΙΚΑ,Η ΕΚΦΡΑΣΗ ΤΟΥ PCNA ΑΠΟΤΕΛΕΙ ΜΙΑ ΠΙΟ ΕΥΑΙΣΘΗΤΗ ΜΕΘΟΔΟ ΕΚΤΙΜΗΣΗΣ ΤΟΥ ΒΑΘΜΟΥ ΚΑΚΟΗΘΕΙΑΣ ΣΕ ΣΧΕΣΗ ΜΕ ΤΗΝ ΕΞΕΤΑΣΗ ΤΗΣ ΠΛΟΕΙΔΙΚΟΤΗΤΑΣ ΤΟΥ ΟΓΚΟΥ.ΣΕ

THE PURPOSE OF THIS STUDY WAS TO ASSESS THE FRACTION OF PROLIFERATING CELLS IN TRANSITIONAL CELL CARCINOMAS OF THE URINARY BLADDER (TCCS)BY PROLIFERATING CELL NUCLEAR ANTIGEN (PCNA) IMMUNOSTAINING AND TO CORRELATE THE FINDINGS TO GRADE, INVASIVENESS AND DNA PLOIDY.PCNA DETERMINATIONS, FROM 60 CASES, WERE CARRIED OUT ON PARAFFIN SECTIONS USING THE ANTI-PCNA MONOCLONAL ANTIBODY PC-10 AND BY EMPLOYING THE ANIDIN-EXTRAVIDIN METHOD.DNA DETERMINATIONS WERE MADE ON IMPRINTS OF THE SAME TUMORS AND THE SLIDES WERE STAINED BY THE FEULGEN METHOD.FOR EACH PATIENT PCNA EXPRESSION AND DNA INDEX WERE MEASURED USING THE CAS 100 IMAGE ANALYZER.STATISTICALLY SIGNIFICANT DIFFERENCES WERE FOUND FOR LOW PCNA EXPRESSION TUMORS BETWEEN GRADE IIII(P<0.01) AND FOR HIGH PCNA EXPRESSION TUMORS BETWEEN GRADE I-IV)P<0.01).ALSO STATISTICALLY SIGNIFICANT DIFFERENCES WERE FOUND FOR DIPLOID TUMORS DETWEEN GRADE I-IV(P<0.01) AND FOR ANEUPLOID TUMORS BETWEEN GRADE II-IV(P=0.05). FURTHERMORE, DIFFERENCES WERE ALSO FOUND BETWEEN STAGES FOR LOW AND HIGH PCNA EXPRESSION TUMORS (P<0.01) AS WELL AS FOR DIPLOID AND ANEUPLOID TUMORS(P<0.01).STATISTICALLY,SIGNIFICANT CORRELATIONS WERE FOUND BETWEEN PCNA EXPRESSION AND DNA INDEX IN GRADES II AND III(R=0.73,AND R=0.55).SIGNIFICANT CORRELATION COEFFICIENTS WERE ALSO OBSERVED IN GRADE II/STAGE TA,STAGE II/STAGE T1 AND GRADE III/STAGE T2(R=0.66,R=0.64 AND R=0.65), WHEREAS FOR GRADE I/STAGE TA THE COEFFICIENT OF CORRELATION WAS NON-SIGNIFICANT (R=0.48).IN CONCLUSION, PCNA EXPRESSION CORRELATES TO DNA PLOIDY, GRADE AND INVASIVENESS OF THE TUMOR.DETERMINATION OF PCNA EXPRESSION, ON PARAFFIN EMBEDDED SE