ΜΟΡΙΑΚΗ ΜΕΛΕΤΗ ΤΗΣ ΟΖΩΔΟΥΣ ΣΚΛΗΡΥΝΣΗΣ

Abstract

Η ΟΖΩΔΗΣ ΣΚΛΗΡΥΝΣΗ ΕΙΝΑΙ ΝΕΥΡΟΛΟΓΙΚΗ ΠΟΛΥΣΥΣΤΗΜΑΤΙΚΗ ΥΠΕΡΕΧΟΥΣΑ ΑΥΤΟΣΩΜΙΚΗ ΚΛΗΡΟΝΟΜΙΚΗ ΑΣΘΕΝΕΙΑ. Η ΣΥΧΝΟΤΗΤΑ ΤΗΣ ΕΙΝΑΙ 1:10000, ΚΛΗΡΟΝΟΜΕΙΤΑΙ ΣΤΟ 25% ΤΩΝ ΠΕΡΙΠΤΩΣΕΩΝ, ΕΝΩ ΤΟ75% ΟΦΕΙΛΕΤΑΙ ΣΕ DE NOVO ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ. ΤΑ ΥΠΕΥΘΥΝΑΓΟΝΙΔΙΑ TSC1 ΚΑΙ TSC2 ΕΔΡΑΖΟΝΤΑΙ Σ ΤΑ ΧΡΩΜΟΣΩΜΑΤΑ 9Q34 ΚΑΙ 16P13 ΚΑΙ ΑΠΟΤΕΛΟΥΝΤΑΙ ΑΠΟ 23 ΚΑΙ 41 ΕΞΟΝΙΑ, ΑΝΤΙΣΤΟΙΧΑ. ΚΑΙ ΤΑ ΔΥΟ ΘΕΩΡΟΥΝΤΑΙ ΟΓΚΟΚΑΤΑΣΤΑΛΤΙΚΑ ΓΟΝΙΔΙΑ. ΜΕΧΡΙ ΣΗΜΕΡΑ ΕΧΟΥΝ ΑΝΙΧΝΕΥΘΕΙ ΚΑΙ ΣΤΑ ΔΥΟ ΓΟΝΙΔΙΑ ΜΙΚΡΕΣ ΑΝΑΔΙΑΤΑΞΕΙΣ ΚΑΙ ΣΗΜΕΙΑΚΕΣ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ. ΜΕΓΑΛΕΣ ΑΝΑΔΙΑΤΑΞΕΙΣ ΠΑΡΑΤΗΡΗΘ ΗΚΑΝ ΜΟΝΟ ΣΤΟ ΤSC2. ΣΤΗΝ ΠΑΡΟΥΣΑ ΕΡΓΑΣΙΑ ΜΕΛΕΤΗΘΗΚΑΝ 37 ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΜΕ ΟΖΩΔΗ ΣΚΛΗΡΥΝΣΗ ΓΙΑ ΤΗΝ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΩΝ ΣΤΟ ΓΟΝΙΔΙΟ TSC2. ΤΑ ΔΕΙΓΜΑΤΑ ΑΝΑΛΥΘΗΚΑΝ ΜΕ ΥΒΡΙΔΙΣΜΟ SOUTHERN, ΑΛΥΣΙΔΩΤΗ ΑΝΤΙΔΡΑΣΗ ΤΗΣ ΠΟΛΥΜΕΡΑΣΗΣ, ΧΗΜΙΚΗ ΠΕΨΗ ΕΤΕΡΟΔΙΜΕΡΩΝ, ΑΝΑΛΥΣΗ ΠΟΛΥΜΟΡ ΦΙΣΜΩΝ ΔΙΑΜΟΡΦΩΣΗΣ ΑΠΛΗΣ ΑΛΥΣΙΔΑΣ, ΑΝΑΛΥΣΗ ΠΟΛΥΜΟΡΦΙΣΜΩΝ ΜΗΚΟΥΣ ΠΕΡΙΟΡΙΣΤΙΚΩΝ ΘΡΑΥΣΜΑΤΩΝ ΚΑΙ ΑΠ' ΕΥΘΕΙΑΣ ΠΡΩΤΟΔΙΑΤΑΞΗ. ΣΕ ΕΝΑ ΔΕΙΓΜΑ ΒΡΕΘΗΚΕ ΕΛΛΕΙΜΜΑ 2KB. δΝΔΕΚΑ ΝΕΟΙ ΠΟΛΥΜΟΡΦΙΣΜΟΙ ΕΝΤΟΠΙΣΘΗΚΑΝ ΣΕ ΙΝΤΡΟΝΙΑ. ΤΕΣΣΕΡΙΣ ΑΠΟ ΑΥΤΟΥΣ ΕΙΝΑΙ ΣΥΧΝΟΙ ΣΤΟ ΓΕΝΙΚΟ ΠΛΗΘΥ ΣΜΟ ΤΗΣ ΒΟΡΕΙΟΥ ΕΛΛΑΔΟΣ. ΕΝΝΕΑ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΒΡΕΘΗΚΑΝ ΣΕΟΚΤΩ ΑΣΘΕΝΕΙΣ. ΕΠΤΑ ΑΠΟ ΑΥΤΕΣ ΠΕΡΙΓΡΑΦΟΝΤΑΙ ΓΙΑ ΠΡΩΤΗ ΦΟΡΑ. ΤΡΕΙΣ ΕΙΝΑΙ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΜΕ ΛΑΘΟΣ ΝΟΗΜΑ, ΤΡΕΙΣ ΕΝΔΕΧΕΤΑΙ ΝΑ ΠΡΟΚΑΛΟΥΝ ΔΙΑΦΟΡΙΚΗ ΣΥΡΡΑΦΗ, ΔΥΟ ΕΙΝΑΙ ΕΛΛΕΙΜΜΑΤΑ ΠΟΥ ΜΕΤΑΤΟΠΙΖΟΥΝ ΤΟ ΑΝΑΓΝΩΣΤΙΚΟ ΠΛΑΙΣΙΟ ΚΑΙ ΜΙΑ ΕΙΝΑΙ ΜΕΤΑΛΛΑΞΗ ΧΩΡΙΣ ΝΟΗΜΑ. ΟΙ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΚΛΗΡΟΝΟΜΟΥΝΤΑΙ ΣΕ ΟΛΟΥΣ ΤΟΥΣ ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΤΗΣ ΙΔΙΑΣ ΟΙΚΟΓΕΝΕΙΑΣ, ΕΝΩ ΣΕ ΚΑΜΙΑ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΔΕΝ ΕΜΦΑΝΙΖΟΝΤΑΙ ΣΕ ΜΗ-ΑΣΘΕΝΕΙΣ, ΓΕΓΟΝΟΣ ΠΟΥ ΕΝΙΣΧΥΕΙ ΤΗΝ ΥΠΟΘΕΣΗ ΟΤΙ ΑΥΤΕΣ ΕΙΝΑΙ ΟΙ ΜΕΤΑΛΛΑΞΕΙΣ ΟΙ ΟΠΟΙΕΣ ΠΡΟΚΑ ΛΟΥΝ ΤΗΝ ΑΣΘΕΝΕΙΑ.

TUBEROUS SCLEROSIS IS A NEUROLOGICAL POLYSYSTEMIC AUTOSOMAL DOMINANT INHERITED DISEASE. IT' S FREQUENCY IS 1:10000 AND IT IS INHERITED IN 25% OF THE CASES, WHILE 75% ARE CAUSED BY DE NOVO MUTATIONS. THE RESPONSIBLE GENES TSC1 AND TSC2 ARE LOCATED ON CHOROM OSOMES 9Q34 AND 16P13 AND HAVE 23 AND 41 EXONS, RESPECTIVELY. BOTH GENES ARE CONSIDERED TO BE TUMOUR SUPPRESOR GENES. MUTATION ANALYSIS IN BOTH GENES REVEALED THE EXISTENCE OF SMALL REARRANGEMENTS AND POINT MUTATIONS. LARGE REARRAGNEMENTS WERE DETECTED ONL Y IN THE TSC2 GENE. IN TE PRESENT STUDY, 37 PATIENTS WITH TUBEROUS SCLEROSIS WERE STUDIED FOR MUTATION IN TSC2. THE SAMPLES WERE ANALYSED BY SOUTHERN HYBRIDISATION, POLYMERASE CHAIN REACTION, CHEMICAL MISMATCH CLEAVAGE, SINGLE STRAND CONFORMATION POLYMORPH ISMS ANALYSIS, RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISMS ANALYSIS AND DIRECT SEQUENCING. A 2 KB DELETION WAS DETECTED IN ONE SAMPLE. ELEVEN NOVEL POLYMORPHISMSWERE FOUND IN INTRONS, FOUR OF WHICH ARE COMMON IN THE GENERAL POPULATION OFNORTHERN GREECE. NI NE MUTATIONS WERE DETECTED IN EIGHT PATIENTS. SEVEN OF THOSE WERE DESCRIBED FOR THE FIRST TIME. THREE MUTATIONS WERE MISSENCE, THREE PROBABLY CAUSE ALTERNATIVE SPLICING, TWO WERE DELETIONS CAUSING FRAME-SHIFT AND PREMATURE PROTEIN TERMINATION AND ONE IS A NOS-SENCE MUTATION. THE MUTATIONS ARE INHERITED IN ALL AFFECTED INDIVIDUALS WITHIN THE FAMILY BUT NOT IN ANY OF THE UNAFFECTED ONES, SUGGESTING THAT THESE ARE THE MUTATIONS CAUSING THE DISEASE IN THE SPECIFIC FAMILIES.